[发明专利]利用毕赤酵母表达人溶菌酶-抗菌肽Parasin I融合蛋白的方法在审
| 申请号： | 201510098860.8 | 申请日： | 2015-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN104630259A | 公开（公告）日： | 2015-05-20 |
| 发明（设计）人： | 赵华;汤加勇;贾刚;刘光芒;陈小玲;蔡景义 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/62;C12N15/56;C12N15/12;C12R1/84 |
| 代理公司： | 成都中亚专利代理有限公司 51126 | 代理人： | 何渊 |
| 地址： | 625014 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开一种人溶菌酶-抗菌肽Parasin I融合蛋白，同时还提供了其基因工程制备方法，本发明进一步提供了该融合蛋白经酶切后对微生物具有较强的抑菌作用，通过基因重组方式以融合蛋白的形式将人溶菌酶和抗菌肽Parasin I基因连接至高效真核表达载体上，进一步在酵母菌中表达，得到具有高活性的抗菌重组蛋白，该重组蛋白可以作为添加剂应用于动物饲料中。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 酵母 表达 人溶菌酶 抗菌 parasin 融合 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种利用毕赤酵母表达人溶菌酶‑抗菌肽Parasin I融合蛋白的方法，包括以下步骤：（1）提供人溶菌酶和抗菌肽Parasin I蛋白的氨基酸序列，以及根据毕赤酵母密码子优化后的重组基因序列hLY‑PI；（2）构建酵母细胞中表达hLY‑PI的重组质粒pPICZαA‑ hLY‑PI；（3）重组质粒pPICZαA‑hLY‑PI转化毕赤酵母X‑33细胞；（4）鉴定并筛选高表达转化菌株；（5）培养转化菌，获得人溶菌酶‑抗菌肽Parasin I融合蛋白；（6）人溶菌酶‑抗菌肽Parasin I融合蛋白的鉴定及酶学活性分析。
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