[发明专利]一种高稳定性重组降钙素原、制备方法及用途有效
申请号: | 201510085322.5 | 申请日: | 2015-02-16 |
公开(公告)号: | CN104610443B | 公开(公告)日: | 2017-08-29 |
发明(设计)人: | 修冰水;张贺秋;阙海萍;王晓丹;冯晓燕;杨锡琴;张旭辉;刘志强;段翠密 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 |
主分类号: | C07K14/585 | 分类号: | C07K14/585;C12N15/16;C12N15/70;G01N33/74 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司11246 | 代理人: | 陈波 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种高稳定性重组降钙素原,该蛋白的结构为PCT氨基多肽‑连接臂1‑降钙素‑连接臂2‑降钙蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO1所示。本发明以柔性肽链连接臂替换了PCT中易于降解的58‑59aa,92‑95aa两部分肽链,采用大肠杆菌优势密码子反向翻译上述抗原的氨基酸序列,获得由大肠杆菌优势密码子组成的高稳定性PCT抗原基因,然后进行克隆表达,获得高稳定性PCT抗原。相比野生型PCT,该抗原除了具有更高稳定性,还保持了野生PCT的抗原性。本发明提供的高稳定性PCT蛋白基因是采用大肠杆菌优势密码子组成,在大肠杆菌中的具有较高的表达量,适合大量制备。同时重组PCT可用于免疫检测中标准品的制备及标准曲线的绘制,从而实现对PCT含量的准确定量。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定性 重组 降钙素 制备 方法 用途 | ||
【主权项】:
一种高稳定性重组降钙素原,其特征在于:所述重组降钙素原片段结构为降钙素原氨基多肽‑连接臂1‑降钙素‑连接臂2‑降钙蛋白,其中氨基多肽、降钙素、降钙蛋白位点位于1‑57aa、60‑91aa及96‑116aa,连接臂1为‑Gly‑Gly‑,连接臂2为‑Ser‑Gly‑Gly‑Gly‑,所述重组降钙素原氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
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