[发明专利]一种制备胎盘造血干细胞制剂的方法有效
| 申请号: | 201510078363.1 | 申请日: | 2015-02-13 |
| 公开(公告)号: | CN104739865B | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
| 发明(设计)人: | 杜小春;陈锦阳;李程;项春生 | 申请(专利权)人: | 杭州易文赛生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;A01N1/02 |
| 代理公司: | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人: | 王浩然;周建秋 |
| 地址: | 311121 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | 本发明提供了一种制备胎盘造血干细胞制剂的方法,该方法包括如下步骤:(1)用酶溶液消化胎盘组织,得到消化产物并去除所述消化产物中的组织残渣,得到酶解液;(2)将所述酶解液与羟乙基淀粉溶液混合并使混合得到的物料分层,得到上层的有核细胞悬液;(3)将所述有核细胞悬液与冻存液混合;其中,所述酶溶液含有Ⅰ型胶原酶、DNA酶I、分散酶和透明质酸酶;所述冻存液中含有二甲基亚砜、羟乙基淀粉、人血白蛋白和右旋糖酐。通过上述技术方案,本发明能够在提高胎盘造血干细胞分离效率的同时,还能使冻存的胎盘造血干细胞在升温至常温后直接用于干细胞治疗。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 制备 胎盘 造血 干细胞 制剂 方法 | ||
【主权项】:
1.一种制备胎盘造血干细胞制剂的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1)用酶溶液消化胎盘组织,得到消化产物并去除所述消化产物中的组织残渣,得到酶解液;(2)将所述酶解液与羟乙基淀粉溶液混合并使混合得到的物料分层,得到上层的有核细胞悬液;(3)将所述有核细胞悬液与冻存液混合;其中,所述酶溶液含有200‑300IU/mL的Ⅰ型胶原酶、30‑50IU/mL的DNA酶I、1.5‑3.5IU/mL的分散酶和600‑800IU/mL的透明质酸酶;所述冻存液中含有35‑50mL/L的二甲基亚砜、10‑20g/L的羟乙基淀粉、50‑100g/L的人血白蛋白、10‑20g/L的右旋糖酐、5‑5.5g/L的氯化钠、4.5‑5g/L的葡萄糖酸钠、3.4‑3.9g/L的醋酸钠、0.3‑0.45g/L的氯化钾和0.2‑0.4g/L的氯化镁。
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