[发明专利]一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法

摘要

本发明公开了一种用于监测癌细胞骨转移的同位素示踪方法，是以41Ca为示踪剂，以加速器质谱(AMS)为示踪剂的测量方法，用于监测癌细胞骨转移发生、发展及消退过程，属于核技术应用领域。本发明包括如下步骤(1)41Ca标记示踪剂的生成；(2)用41Ca标记示踪剂标记实验裸鼠；(3)采集步骤(2)所述裸鼠的尿样，分离出Ca元素；(4)取步骤(3)所得氟化钙粉末，测定41Ca/40Ca同位素丰度比；(5)绘制标准曲线；(6)分析差值，得到癌细胞骨转移程度。本发明解决了现有监测手段的灵敏度都相对较低、难以实现癌细胞骨转移的早期监测的问题，具有较高的临床应用价值和社会效益。

主权项

一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)41Ca标记示踪剂的生成：取丰度＞99％的40CaCO3，在重水反应堆上照射100±10小时，得到41CaCO3，然后溶于浓HCl溶液，生成41CaCl2溶液，即为41Ca标记示踪剂；(2)用41Ca标记示踪剂标记实验裸鼠：将步骤(1)所得41Ca标记示踪剂，按剂量，注射在实验裸鼠体内；(3)采集步骤(2)所述裸鼠的尿样，分离出Ca元素，包括如下步骤：①在采集的尿样中，加入稳定的CaCO3为载体，先用浓HCl消解，再加热浓缩，得到溶液A；②在溶液A中，加入去离子水，离心后，去除沉淀，保留上层清液；③在步骤②所得上层清液中，加入过量14mol/L的氨水，得到溶液B，并使溶液B的pH值始终＞10；④在溶液B中，加入过量5％w/v的草酸铵溶液，静置≥10h，离心后，得到草酸钙沉淀；⑤将步骤④所得草酸钙沉淀，用14mol/L的氨水冲洗后，置于空气中风干，再溶于5ml的0.1mol/L的HCl溶液，得到溶液C；⑥在溶液C中，加入过量40％w/v的HF酸，静置≥10h，离心后，得到氟化钙沉淀；⑦将步骤⑥所得氟化钙沉淀，用去离子水清洗；⑧将步骤⑦所得去离子水清洗后的氟化钙，烘烤后，粉碎，得到氟化钙粉末，待测；(4)取步骤(3)所得氟化钙粉末，测定41Ca/40Ca同位素丰度比，包括如下步骤：①取氟化钙粉末，加入高纯PbF2粉末，混合均匀后，压入离子源样品靶锥；②从离子源引出CaF3‑负离子，C剥离后，得到Ca7+离子，并通过探测器计数；③通过离子源交替引出40CaF3‑负离子和41CaF3‑负离子，分别测量40CaF3‑和41Ca7+离子，得到步骤(2)所述实验裸鼠尿样的41Ca/40Ca同位素丰度比；(5)绘制标准曲线：定时采集步骤(2)所述实验裸鼠的尿样，重复上述步骤(3)‑(4)，分别得到不同时间段的41Ca/40Ca同位素丰度比数值，以时间为横坐标，以相应的41Ca/40Ca同位素丰度比数值为纵坐标，绘制成曲线，当相邻两纵坐标的差值≤3％，即所述实验裸鼠体内已标记了41Ca，即得到标准曲线；(6)分析差值，得到骨代谢交换率变化值：继续定时采集步骤(2)所述实验裸鼠的尿样，重复上述步骤(3)‑(4)，分别得到不同时间段的41Ca/40Ca同位素丰度比数值，并与步骤(5)所得标准曲线比较，得到差异值，即为骨代谢交换率变化值。