[发明专利]一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法有效
申请号: | 201510074691.4 | 申请日: | 2015-02-12 |
公开(公告)号: | CN104698063B | 公开(公告)日: | 2017-09-19 |
发明(设计)人: | 沈洪涛;姜山;何明;董克君;庞芳芳;史颜君;夏春波;刘曼君 | 申请(专利权)人: | 广西师范大学 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;A61K51/00 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司11212 | 代理人: | 周玉红 |
地址: | 541004 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 监测 癌细胞 转移 同位素 方法 | ||
1.一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)41Ca标记示踪剂的生成:取丰度>99%的40CaCO3,在重水反应堆上照射100±10小时,得到41CaCO3,然后溶于浓HCl溶液,生成41CaCl2溶液,即为41Ca标记示踪剂;
(2)用41Ca标记示踪剂标记实验裸鼠:将步骤(1)所得41Ca标记示踪剂,按剂量,注射在实验裸鼠体内;
(3)采集步骤(2)所述裸鼠的尿样,分离出Ca元素,包括如下步骤:
①在采集的尿样中,加入稳定的CaCO3为载体,先用浓HCl消解,再加热浓缩,得到溶液A;
②在溶液A中,加入去离子水,离心后,去除沉淀,保留上层清液;
③在步骤②所得上层清液中,加入过量14mol/L的氨水,得到溶液B,并使溶液B的pH值始终>10;
④在溶液B中,加入过量5%w/v的草酸铵溶液,静置≥10h,离心后,得到草酸钙沉淀;
⑤将步骤④所得草酸钙沉淀,用14mol/L的氨水冲洗后,置于空气中风干,再溶于5ml的0.1mol/L的HCl溶液,得到溶液C;
⑥在溶液C中,加入过量40%w/v的HF酸,静置≥10h,离心后,得到氟化钙沉淀;
⑦将步骤⑥所得氟化钙沉淀,用去离子水清洗;
⑧将步骤⑦所得去离子水清洗后的氟化钙,烘烤后,粉碎,得到氟化钙粉末,待测;
(4)取步骤(3)所得氟化钙粉末,测定41Ca/40Ca同位素丰度比,包括如下步骤:
①取氟化钙粉末,加入高纯PbF2粉末,混合均匀后,压入离子源样品靶锥;
②从离子源引出CaF3-负离子,C剥离后,得到Ca7+离子,并通过探测器计数;
③通过离子源交替引出40CaF3-负离子和41CaF3-负离子,分别测量40CaF3-和41Ca7+离子,得到步骤(2)所述实验裸鼠尿样的41Ca/40Ca同位素丰度比;
(5)绘制标准曲线:定时采集步骤(2)所述实验裸鼠的尿样,重复上述步骤(3)-(4),分别得到不同时间段的41Ca/40Ca同位素丰度比数值,以时间为横坐标,以相应的41Ca/40Ca同位素丰度比数值为纵坐标,绘制成曲线,当相邻两纵坐标的差值≤3%,即所述实验裸鼠体内已标记了41Ca,即得到标准曲线;
(6)分析差值,得到骨代谢交换率变化值:继续定时采集步骤(2)所述实验裸鼠的尿样,重复上述步骤(3)-(4),分别得到不同时间段的41Ca/40Ca同位素丰度比数值,并与步骤(5)所得标准曲线比较,得到差异值,即为骨代谢交换率变化值。
2.根据权利要求1所述的一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法,其特征在于,步骤(1)所述反应堆的热中子通量为(5.0±0.5)×1014个/s·cm2,照射后的比活度为(5.0±0.2)×106Bq/g。
3.根据权利要求1所述的一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法,其特征在于,步骤(2)所述剂量为单只裸鼠5纳居里。
4.根据权利要求1所述的一种用于测定骨代谢交换率变化值的方法,其特征在于,步骤(3)①所述尿样的量为10ml,所述CaCO3的量为2mg,所述浓HCl的量为10ml,所述消解的时间为30分钟,所述浓缩的量为2ml。
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