[发明专利]一种催化DNA合成效率提高的DNA聚合酶有效
申请号: | 201510039501.5 | 申请日: | 2015-01-26 |
公开(公告)号: | CN104560909B | 公开(公告)日: | 2017-09-29 |
发明(设计)人: | 吴静 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种催化DNA合成效率提高的DNA聚合酶,属于生物工程技术领域。本发明先将Dbh第241‑245的氨基酸KSKIP突变为RVRKS,或将第250位的L突变为V,或将第221位的A突变为S,或将第76位的M突变为I,再在突变体的N端以柔性linker融合Sso7d,构建出核苷酸掺入效率提高的Dbh,即Sdbh M76I、Sdbh A221S、Sdbh KSKIP(241‑245)RVRKS和Sdbh L250V这四个正向突变体,同时也提供了一种通过突变酶非保守位点增强酶持续合成能力的方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 催化 dna 合成 效率 提高 聚合 | ||
【主权项】:
一种持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh,其特征在于,是先将Dbh第241‑245的氨基酸KSKIP突变为RVRKS,或将第250位的L突变为V,或将第221位的A突变为S,或将第76位的M突变为I,再在突变体的N端以柔性linker融合Sso7d得到;所述Dbh的出发氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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