[发明专利]一种催化DNA合成效率提高的DNA聚合酶有效
申请号: | 201510039501.5 | 申请日: | 2015-01-26 |
公开(公告)号: | CN104560909B | 公开(公告)日: | 2017-09-29 |
发明(设计)人: | 吴静 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 催化 dna 合成 效率 提高 聚合 | ||
1.一种持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh,其特征在于,是先将Dbh第241-245的氨基酸KSKIP突变为RVRKS,或将第250位的L突变为V,或将第221位的A突变为S,或将第76位的M突变为I,再在突变体的N端以柔性linker融合Sso7d得到;所述Dbh的出发氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的DNA聚合酶Dbh,其特征在于,编码柔性linker的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根据权利要求1所述的DNA聚合酶Dbh,其特征在于,编码Sso7d的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
4.一种持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh,其特征在于,是先将Dbh第241-245的氨基酸KSKIP突变为RVRKS,或将第250位的L突变为V,或将第221位的A突变为S,或将第76位的M突变为I。
5.一种获得权利要求1-4任一所述持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh的方法,其特征在于,通过定点突变获得突变体。
6.编码权利要求1-4任一所述持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh的核苷酸。
7.携带权利要求6所述核苷酸的载体或重组细胞。
8.含有权利要求1-4任一所述持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh的试剂盒。
9.权利要求1-4任一所述持续合成能力增强的DNA聚合酶Dbh的应用。
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