[发明专利]一种基于DNA酶检测钾离子浓度的方法

摘要

本发明提供一种基于DNA酶检测钾离子浓度的方法。包括：配制标准溶液DNA酶体系；配制待测溶液DNA酶体系；配制标准溶液及待测溶液；测量标准溶液在420nm处的吸光度，绘制钾离子浓度与吸光强度值的标准曲线；测量待测溶液的吸光度，根据标准曲线，得到待测样品中钾离子的浓度。本发明利用DNA酶特异识别钾离子调控的G-四链体结构，可在生理钠离子浓度下操作而不受影响，对钾离子特异性高；使用DNA酶设计的探针，对钾离子调控的G-四链体结构变化十分敏感，伴有颜色的改变，同时在紫外吸收光谱中有明显的变化；只需要紫外吸收光谱仪，测试成本低；所用试剂品种少，只需按比例混合就可检测，操作简单、快捷且成本低廉，该体系在缓冲液中操作，环保无污染。

主权项

一种基于DNA酶检测钾离子浓度的方法，包括下述：(1)配制标准溶液DNA酶体系用含钠离子的缓冲液溶解可溶性钾盐配置多个浓度梯度的钾离子溶液，分别向每个浓度梯度的钾离子溶液中加入DNA，得到多个DNA含量相同的钾离子‑DNA体系；所述多个DNA含量相同的钾离子‑DNA体系反应后，得到多个构象不同的DNA G‑四链体的体系，分别向各个所述DNA G‑四链体的体系中加入氯化血红素，得到氯化血红素含量相同的多个DNA G‑四链体‑氯化血红素体系，所述多个DNAG‑四链体‑氯化血红素体系反应后，得到多个标准溶液DNA酶体系；所述DNA为能够形成G‑四链体的DNA；(2)配制待测溶液DNA酶体系将待测样品加入到所述含钠离子的缓冲液，得到待测样品溶液，向所述待测样品溶液中加入所述DNA，得到待测样品‑DNA体系，所述待测样品‑DNA体系中所述DNA的含量与所述多个DNA含量相同的钾离子‑DNA体系中所述DNA的含量相同；所述待测样品‑DNA体系反应后，得到DNA G‑四链体的体系，向该体系中加入氯化血红素，反应后，得到DNA G‑四链体‑氯化血红素体系，所述DNA G‑四链体‑氯化血红素体系中的氯化血红素含量与所述多个DNA G‑四链体‑氯化血红素体系中的氯化血红素含量相同；所述DNA G‑四链体‑氯化血红素体系反应后，得到待测溶液DNA酶体系；(3)标准溶液及待测溶液的配制将2,2′‑联氨‑双(3‑乙基苯并噻唑啉‑6‑磺酸)二胺盐ABTS溶液与H2O2混合，得到混合液，将该混合液称为底物溶液，向所述多个标准溶液DNA酶体系中的每一个标准溶液DNA酶体系中加入所述底物溶液进行反应，得到多个标准溶液样本；向所述待测溶液DNA酶体系中加入所述底物溶液进行反应，得到待测溶液样本；(4)标准曲线的制备测量所述多个标准溶液样本在420nm处的吸光度，绘制钾离子浓度与吸光强度值的标准曲线；(5)待测样本检测测量所述待测溶液样本在420nm处的吸光度，根据所述标准曲线，得到所述待测样品中钾离子的浓度。