[发明专利]工程化苯丙氨酸解氨酶多肽

摘要

本发明提供了工程化苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia‑lyase，PAL)多肽及其组合物，以及编码工程化苯丙氨酸解氨酶(PAL)多肽的多核苷酸。在一些实施方案中，工程化PLA多肽被优化以提供增强的催化活性、以及降低的对蛋白水解的敏感性和增加的对酸性pH水平的耐受性。在一些实施方案中，工程化PLA多肽被去免疫化(deimmunized)。本发明还涉及包含工程化PAL多肽的组合物用于治疗和工业目的的用途。

主权项

1.一种具有苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的工程化多肽，所述工程化多肽由具有与参考序列SEQ ID NO:4至少97％的序列同一性的氨基酸序列组成并且所述工程化多肽与SEQ ID NO:4相比的氨基酸残基差异选自H307G/Q/M或H307G与以下置换中的一个或更多个的组合：A39V、T54K、G59R、S73K、A112C、R134Q、A91V、Q240R/W、A256G、N290G、Y304H、R305M、E308Q、L349M、D353A/N、S399N、P404A、L407V、T460G、E509L、Q521K、K522Y、T524S、P528L、S546R和P564G/L/M；并且所述工程化多肽与所述参考序列SEQ ID NO:4相比表现出选自以下的改进的特性：i)增强的催化活性、ii)降低的对蛋白水解的敏感性、iii)增加的对酸性pH的耐受性、iv)降低的免疫原性、或i)、ii)、iii)和iv)的任何组合。