[发明专利]一种快速测定维生素D3含量的色谱方法

摘要

本发明公开了一种快速测定维生素D3含量的色谱方法，运用高效液相色谱法(HPLC) 测定维生素D3含量的方法，通过对色谱条件的巧妙优化，最终达到快速而准确地对复杂组分样品中维生素D3含量的测定。该色谱方法包括以下步骤: （1）对照品溶液的制备；（2）样品处理；（3）液相色谱条件：色谱柱：硅胶柱，50×4.6mm，2.7μm；流速：2ml/min；流动相：将异丙醇与正己烷按照异丙醇：正己烷=0.5：99.5的体积比混合均匀；检测波长：264nm；进样量：75μl。该色谱方法能够简便、快速、准确的测定维生素D3含量，缩短分析时间，减少溶剂使用量，降低分析成本。

主权项

一种快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）对照品溶液的配制：采用USP 标准品作为维生素D3对照品，精密称定一定量的维生素D3 对照品，用正己烷溶解，配制成浓度为45‑55mg/mL 的标准储备液，每次试验前用正己烷稀释储备液，配制成浓度为0.45‑0.55μg/mL的标准工作溶液；（2）样品处理：精密称取一定量样品于一棕色容量瓶中，加二甲亚砜，塞紧瓶塞；将上述溶液于超声水浴机中60℃下强烈超声约45分钟，取出冷却至室温；再加入正己烷，强烈振摇，再加18%NaCl溶液，充分振摇5分钟，待静置分层后，轻轻吸取上层液体于50mL离心管中，高速离心15分钟；取正己烷层上清液注入液相色谱仪；（3）液相色谱条件：色谱柱：硅胶柱，50×4.6mm，2.7μm；流速： 2ml/min；流动相：将异丙醇与正己烷按照异丙醇：正己烷=0.5：99.5 的体积比混合均匀；检测波长：264nm；进样量：75μl。