[发明专利]一种快速测定维生素D3含量的色谱方法

权利要求书

1.一种快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）对照品溶液的配制：

采用USP 标准品作为维生素D3对照品，精密称定一定量的维生素D3 对照品，用正己烷溶解，配制成浓度为45-55mg/mL 的标准储备液，每次试验前用正己烷稀释储备液，配制成浓度为0.45-0.55μg/mL的标准工作溶液；

（2）样品处理：

精密称取一定量样品于一棕色容量瓶中，加二甲亚砜，塞紧瓶塞；将上述溶液于超声水浴机中60℃下强烈超声约45分钟，取出冷却至室温；再加入正己烷，强烈振摇，再加18%NaCl溶液，充分振摇5分钟，待静置分层后，轻轻吸取上层液体于50mL离心管中，高速离心15分钟；取正己烷层上清液注入液相色谱仪；

（3）液相色谱条件：

色谱柱：硅胶柱，50×4.6mm，2.7μm；

流速： 2ml/min；

流动相：将异丙醇与正己烷按照异丙醇：正己烷=0.5：99.5 的体积比混合均匀；

检测波长：264nm；

进样量：75μl。

2.如权利要求1所述的快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：

通过对照品的保留时间对样品进行定性，外标法计算样品中维生素D3的含量，该计算公式为：

式中    A样：为样品溶液中维生素D3峰面积；

C标：为标准工作溶液的浓度，μg/mL；

A标：为标准工作溶液中维生素D3峰面积；

W样：为样品称重，g。

3.如权利要求1所述的快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：所述的标准贮备溶液的配制为：精密称取一定量的维生素D3对照品于一棕色容量瓶中，立即用正己烷溶解并稀释至刻度。

4.如权利要求1所述的快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：所述的标准工作溶液的配制为：精密吸取一定量标准贮备溶液于一棕色容量瓶中，立即用正己烷溶解并稀释至刻度。

5.如权利要求1所述的快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：所述的步骤二中的样品为固体样品则需先用研钵及研杵研磨成细粉后使用，若样品为液体样品则直接取用，若样品为胶囊样品则取若干胶囊的内容物，研磨混合均匀后使用。

6.如权利要求1所述的快速测定维生素D3含量的色谱方法，其特征在于：所述的方法适用于含维生素D3的片剂、硬胶囊、粉剂、软胶囊、滴剂、丸剂、软糖及饮料，产品可以是保健食品、药品、普通食品或预混料。