[发明专利]一种基于DNA水凝胶检测多个单核苷酸变异或单核苷酸多态性的方法

摘要

本发明属于疾病检测，药物分析领域。本发明涉及检测目标核酸分子，尤其是多个单核苷酸变异或单核苷酸多态性（SNP）。本发明使用一种内部含有支链探针DNA的水凝胶作为检测材料。利用被检测DNA与探针DNA形成双链DNA时，单核苷酸错配的DNA（或含有多个单核苷酸变异的DNA）与完全互补的DNA之间的双链解旋温度（Tm）的差异，通过荧光染料鉴别SNP。本方法省略了各种处理和纯化步骤，具有高效，快速，结果肉眼可测等优点。

主权项

一种非诊断目的的基于DNA水凝胶检测多个单核苷酸变异或单核苷酸多态性的方法，其特征在于，联合DNA水凝胶和核酸荧光染料检测多个单核苷酸变异或单核苷酸多态性，所述的检测包括如下步骤：(1)制备DNA水凝胶，所述DNA水凝胶的结构如下：其中m、n、x的比值为1:10～50：0.00001～0.001；(2)DNA分子杂交和控温洗涤，所述的DNA分子杂交为：将步骤1)中制得的凝胶分别加入到含有完全互补DNA的缓冲液和被检测的含有多个单核苷酸变异或SNPDNA缓冲液中，在特定温度下进行分子杂交和洗涤，在所述特定温度下，完全互补DNA与含有多个单核苷酸变异或SNP的DNA在凝胶中的含量形成显著差异；(3)核酸荧光染料染色成像，所述的核酸荧光染料为选自SYBR Green I、溴化乙锭、PicoGreen、GelRed或GelGreen的可选择性结合双链核酸的染料。