[发明专利]一种多胎羊的检测方法在审
| 申请号： | 201410710810.6 | 申请日： | 2014-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN104328214A | 公开（公告）日： | 2015-02-04 |
| 发明（设计）人： | 左北瑶 | 申请（专利权）人： | 新疆巴音郭楞蒙古自治州畜牧工作站 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 贵阳天圣知识产权代理有限公司 52107 | 代理人： | 杜胜雄 |
| 地址： | 841000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种多胎羊的检测方法，具体步骤为：DNA的提取；引物和探针的设计；PCR-LDR反应；取1μLLDR连接产物与1μLABIGS500ROX荧光标记分子量标准和1μL去离子甲酰胺上样液混合，95℃加热变性2min，冰中骤冷，于含有5mol/L尿素的5%聚丙烯酰胺凝胶中电泳2.5h，进行数据收集、泳道线校正、迁移片段大小测量和校正内在分子量标准，进行数据分析和基因分型。本发明利用连接酶检测反应技术及生物信息学技术，以碱基错配为基础，使用特异性引物和探针对特定片段DNA进行识别，具有准确度高、通用性强、通量大、操作简单、成本低等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 多胎羊 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种多胎羊的检测方法，其特征在于，具体步骤如下：（1）DNA的提取：从羊的颈静脉采血2ml，EDTA抗凝，血液充分混匀后‑20℃冻存后，采用细胞裂解和蛋白去除液从冻存的抗凝全血中得到基因组DNA；（2）引物和探针的设计：根据基因序列设计引物，同时根据LDR探针设计原则设计探针；（3）PCR‑LDR反应，分为PCR反应和LDR反应；（4）数据分析和基因分型：取1μL LDR连接产物与1μL ABI GS 500 ROX荧光标记分子量标准和1μL去离子甲酰胺上样液混合，95℃加热变性2min，冰中骤冷，于含有5mol/L尿素的5%聚丙烯酰胺凝胶中电泳2.5h，进行数据收集、泳道线校正、迁移片段大小测量和校正内在分子量标准；进行数据分析和基因分型。
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