[发明专利]一种拯救流感病毒的方法

摘要

本发明公开了一种拯救重组流感病毒的方法。该方法包括：1)将编码流感病毒鸡胚适应株中PB2、PB1、PA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子以及编码待拯救流感病毒毒株中PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M1和M2、NS1和NS2的cDNA分子这15个cDNA分子每个单独插入真核细胞表达载体，得到15个重组表达载体。2)将所述15个重组表达载体导入包装细胞中，得到重组流感病毒。从该拯救重组流感病毒的方法中得到的重组流感病毒疫苗株在鸡胚中具有高复制力，比传统疫苗在鸡胚中的生长滴度也要高，通过对疫苗种子毒进行抗原性检测发现，疫苗种子毒的抗原性与亲本病毒没有明显差异。

主权项

拯救流感病毒的方法，包括以下步骤：1)将编码流感病毒鸡胚适应株中PB2的cDNA分子、编码所述流感病毒鸡胚适应株中PB1的cDNA分子、编码所述流感病毒鸡胚适应株中PA的cDNA分子、编码所述流感病毒鸡胚适应株中NP的cDNA分子、编码所述流感病毒鸡胚适应株中NA的cDNA分子、编码所述流感病毒鸡胚适应株中M1和M2的cDNA分子和编码所述流感病毒鸡胚适应株中NS1和NS2的cDNA分子，以及编码待拯救流感病毒毒株中PB2的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中PB1的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中PA的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中HA的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中NP的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中NA的cDNA分子、编码所述待拯救流感病毒毒株中M1和M2的cDNA分子和编码所述待拯救流感病毒毒株中NS1和NS2的cDNA分子这15个cDNA分子每个单独插入真核细胞表达载体，得到15个重组表达载体，所述15个重组表达载体为下述a1‑a15中的重组表达载体：a1、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中PB2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株PB2基因表达载体；a2、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中PB1的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株PB1基因表达载体；a3、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中PA的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株PA基因表达载体；a4、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中NP的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株NP基因表达载体；a5、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中NA的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株NA基因表达载体；a6、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中M1和M2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株M基因表达载体；a7、含有编码所述流感病毒鸡胚适应株中NS1和NS2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为鸡胚适应株NS基因表达载体；a8、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中PB2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株PB2基因表达载体；a9、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中PB1的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株PB1基因表达载体；a10、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中PA的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株PA基因表达载体；a11、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中HA的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株HA基因表达载体；a12、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中NP的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株NP基因表达载体；a13、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中NA的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株NA基因表达载体；a14、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中M1和M2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株M基因表达载体；a15、含有编码所述待拯救流感病毒毒株中NS1和NS2的cDNA分子的重组表达载体，其名称为待拯救流感病毒毒株NS基因表达载体；2)将所述15个重组表达载体导入包装细胞中，得到重组流感病毒。