[发明专利]一个软质、抗白粉病普通小麦-簇毛麦易位系的选育、鉴定方法

摘要

本发明公开了一个软质、抗白粉病普通小麦-簇毛麦易位系的选育、鉴定方法。通过普通小麦‐簇毛麦5V异附加系DA5V与中国春ph1b1b突变体杂交、回交，首先利用分子标记从BC₁F₁中鉴定涉及5VS且ph1b1bph1b1b的单株，然后利用GISH技术鉴定单株自交种子，对于含有易位染色体的单株，再利用顺序C‐分带、GISH及分子标记分析，证明易位染色体是T5VS·5AL。利用定位于小麦第5部分同源群染色体上的EST设计PCR引物，筛选可以特异鉴定该易位染色体的共显性标记，能够区分纯合与杂合易位。通过农艺性状、籽粒硬度分析及白粉病抗性鉴定揭示该易位系的育种利用价值。

主权项

一种软质、抗白粉病普通小麦‑簇毛麦T5VS·5AL易位系NAU421的选育方法，其特征在于将中国春突变体CSph1bph1b与普通小麦‑簇毛麦5V染色体异附加系DA5V进行杂交，再用中国春突变体CSph1bph1b进行回交获得BC₁；种植BC₁种子，利用分子标记CINAU41的引物对苗期DNA进行鉴定，鉴定出含有5V染色体的单株；对含有5V染色体的单株再利用ph1b基因特异分子标记ABC302.3的引物进行ph1b隐性纯合体筛选，获得含有外源染色体5V且ph1bph1b纯合单株；将含有外源染色体5V且ph1bph1b纯合体的植株进行花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ染色体配对观察，统计外源染色体与小麦染色体配对频率，将含有部分同源染色体配对的植株套袋自交，获得BC₁F₁，将BC₁F₁种子在培养皿中发芽，分单株剪取根尖进行荧光原位杂交鉴定，分单株提取DNA，利用5VS特异分子标记CINAU41，进行PCR鉴定，对鉴定出涉及5VS的易位系单株套袋自交获得BC₁F₂种子；将BC₁F₂种子种植于温室大棚并提取BC₁F₂单株DNA，再次应用CINAU41的引物对单株DNA进行PCR扩增，经电泳检测，有745bp特异条带的单株表明含有5VS染色体臂,然后再利用5AS特异分子标记Xgwm443的引物对含有5VS染色体臂的单株DNA进行PCR扩增，经电泳检测，扩增不出245bp特异条带的单株表明缺少5AS染色体，即为纯合的T5VS·5AL易位系。