[发明专利]一种高抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法有效

专利信息
申请号: 201410585174.9 申请日: 2014-10-28
公开(公告)号: CN104313099B 公开(公告)日: 2017-08-25
发明(设计)人: 饶胜其;方维明;杨振泉;高璐 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: C12P21/06 分类号: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22
代理公司: 南京钟山专利代理有限公司32252 代理人: 戴朝荣
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明提供了一种高抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法,具体步骤如下鸡蛋清蛋白悬浊液在85℃‑95℃条件下保持10min变性,冷却至室温,先后用碱性蛋白酶和胃蛋白酶各水解1‑6h,灭酶,冷却后离心取上清液;采用截留分子量3kDa膜超滤上述上清液,收集滤过液;真空浓缩后冷冻干燥得到白色或淡黄色的鸡蛋清蛋白抗氧化肽粗品;采用DA201‑C大孔吸附树脂吸附上述滤过液,然后用乙醇梯度洗脱,收集、真空浓缩并冷冻干燥75%的乙醇洗脱组分,即可获得高活性鸡蛋清蛋白抗氧化肽。本发明方法的优点是鸡蛋清蛋白利用率高;工艺简单,成本低廉,便于工业化生产;获得的鸡蛋清蛋白肽具有显著的抗氧化活性,且安全、无毒副作用。
搜索关键词: 一种 氧化 活性 鸡蛋 蛋白 制备 方法
【主权项】:
一种抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)以鸡蛋清蛋白粉为原料,加水配制成质量浓度为1%‑6%的鸡蛋清蛋白悬浊液,在 85℃ ‑95℃保持10min,并不断搅拌使鸡蛋清蛋白变性,冷却至室温后调节pH至6.5‑11.0,按照每克鸡蛋清蛋白6000U‑12000U的酶量添加碱性蛋白酶,50℃‑70℃,水解时间1‑6h;(2)步骤 (1) 酶解结束后,迅速调节pH 值至 1.0‑2.5,按照10000U‑30000U/1g鸡蛋清蛋白的量加入胃蛋白酶,在35℃‑40℃下反应 1‑6h后 95℃保持 15min 灭酶,冷却至室温后调 pH 值至5.0‑6.0,4000r/min 离心 15min, 收集上清液;(3)将步骤 (2) 所得上清液超滤,收集滤过液,真空浓缩后冷冻干燥得鸡蛋清蛋白抗氧化肽粗品;所述超滤的膜截留分子量为 3kDa;(4)取步骤 (3) 所得鸡蛋清蛋白抗氧化肽粗品溶于pH 值为5.0‑6.0 的PBS 缓冲液中,加入DA201‑C 大孔吸附树脂静态吸附 1‑3h,用体积分数为 10‑50% 的乙醇洗涤后,再用体积分数为 50‑100% 的乙醇洗脱,洗脱时间 0.5‑3h,收集、真空浓缩及冷冻干燥 75% 的乙醇洗脱组分,实现高活性鸡蛋清蛋白抗氧化肽的富集。
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