[发明专利]一种高抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法有效
| 申请号: | 201410585174.9 | 申请日: | 2014-10-28 |
| 公开(公告)号: | CN104313099B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
| 发明(设计)人: | 饶胜其;方维明;杨振泉;高璐 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22 |
| 代理公司: | 南京钟山专利代理有限公司32252 | 代理人: | 戴朝荣 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 氧化 活性 鸡蛋 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)以鸡蛋清蛋白粉为原料,加水配制成质量浓度为1%-6%的鸡蛋清蛋白悬浊液,在 85℃ -95℃保持10min,并不断搅拌使鸡蛋清蛋白变性,冷却至室温后调节pH至6.5-11.0,按照每克鸡蛋清蛋白6000U-12000U的酶量添加碱性蛋白酶,50℃-70℃,水解时间1-6h;
(2)步骤 (1) 酶解结束后,迅速调节pH 值至 1.0-2.5,按照10000U-30000U/1g鸡蛋清蛋白的量加入胃蛋白酶,在35℃-40℃下反应 1-6h后 95℃保持 15min 灭酶,冷却至室温后调 pH 值至5.0-6.0,4000r/min 离心 15min, 收集上清液;
(3)将步骤 (2) 所得上清液超滤,收集滤过液,真空浓缩后冷冻干燥得鸡蛋清蛋白抗氧化肽粗品;所述超滤的膜截留分子量为 3kDa;
(4)取步骤 (3) 所得鸡蛋清蛋白抗氧化肽粗品溶于pH 值为5.0-6.0 的PBS 缓冲液中,加入DA201-C 大孔吸附树脂静态吸附 1-3h,用体积分数为 10-50% 的乙醇洗涤后,再用体积分数为 50-100% 的乙醇洗脱,洗脱时间 0.5-3h,收集、真空浓缩及冷冻干燥 75% 的乙醇洗脱组分,实现高活性鸡蛋清蛋白抗氧化肽的富集。
2.如权利要求 1 所述的抗氧化活性鸡蛋清蛋白肽的制备方法,其特征在于:步骤(3) 中,超滤操作前超滤膜要先后用无水乙醇、pH 值为 1-2 的酸液、pH 值为 11-12 的碱液和去离子水各循环清洗 20min,超滤操作压为 0.1-0.2MPa。
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