[发明专利]一种检测养殖废物中雌激素的方法

摘要

本发明公开了一种检测养殖废物中雌激素的方法，该方法包括样品萃取、样品净化、样品洗脱及样品测定步骤，主要以二氯甲烷/甲醇混合溶液为溶剂有效提取养殖固体废弃物中的雌激素，回收率在80％以上；采用硅胶小柱有效去除样品中的大量油脂类物质；运用HPLC/FL分析，方法简单、普遍，荧光检测器选择性高，抗干扰能力强，多种雌激素分离明显，峰形对称，浓度‑峰面积线性关系好。

主权项

一种检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于所述的雌激素为雌二醇，炔雌醇，雌酮，双酚A；该方法包括以下步骤：(1)样品萃取：取养殖场固体废物3‑10g，以体积比为2:1‑4:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液为溶剂，在超声辅助下萃取，合并萃取液，离心，取上清液，用氮气吹溶剂使之挥发，直至剩余溶液1‑2mL；(2)样品净化：取硅胶2‑5g，用正己烷活化，装入径高比为1：10‑15的玻璃柱中，静置，待固体沉降完全，排放正己烷，使其液面和硅胶柱齐平，制备得到净化小柱；将步骤(1)得到的样品用正己烷溶解，再上载到净化小柱，用正己烷清洗，然后用氮气将硅胶柱吹干；(3)样品洗脱：用乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至1‑2ml；(4)样品测定：用高效液相色谱‑荧光检测器进行定量分析，荧光检测器的激发波长和发射波长分别为280nm和310nm；高效液相色谱‑荧光检测器进行分析时采用色谱柱为C18反相柱，流动相为甲醇和水，流速1mL/min，采用梯度洗脱，甲醇初始浓度为30％，在15分钟内升高到50％并保持10分钟，然后再在10分钟内继续升高到100％，并保持5分钟。