[发明专利]一种检测养殖废物中雌激素的方法

权利要求书

1.一种检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于所述的雌激素为雌二醇，炔雌醇，雌酮，双酚A；该方法包括以下步骤：

(1)样品萃取：取养殖场固体废物3-10g，以体积比为2:1-4:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶液为溶剂，在超声辅助下萃取，合并萃取液，离心，取上清液，用氮气吹溶剂使之挥发，直至剩余溶液1-2mL；

(2)样品净化：取硅胶2-5g，用正己烷活化，装入径高比为1：10-15的玻璃柱中，静置，待固体沉降完全，排放正己烷，使其液面和硅胶柱齐平，制备得到净化小柱；

将步骤(1)得到的样品用正己烷溶解，再上载到净化小柱，用正己烷清洗，然后用氮气将硅胶柱吹干；

(3)样品洗脱：用乙腈洗脱，收集洗脱液，浓缩至1-2ml；

(4)样品测定：用高效液相色谱-荧光检测器进行定量分析，荧光检测器的激发波长和发射波长分别为280nm和310nm；高效液相色谱-荧光检测器进行分析时采用色谱柱为C₁₈反相柱，流动相为甲醇和水，流速1mL/min，采用梯度洗脱，甲醇初始浓度为30％，在15分钟内升高到50％并保持10分钟，然后再在10分钟内继续升高到100％，并保持5分钟。

2.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于该方法步骤(1)中二氯甲烷和甲醇的混合溶液体的积比为2:1。

3.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于该方法步骤(1)中所述的萃取条件为萃取2-3次，每次萃取5-15分钟。

4.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于步骤(2)所用的硅胶粒径为过80-100目筛。

5.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于步骤(3)所用的乙腈用量为2-5mL。

6.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于步骤(2)硅胶用正己烷活化的具体步骤是将硅胶中加入正己烷搅拌糊状再倒入玻璃柱。

7.根据权利要求1所述的检测养殖废物中雌激素的方法，其特征在于步骤(2)中的玻璃柱的径高比为1：10。