[发明专利]铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用在审
| 申请号: | 201410466768.8 | 申请日: | 2014-09-12 |
| 公开(公告)号: | CN104232718A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
| 发明(设计)人: | 张学武;郑秋平 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
| 主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/16;A23L1/29;A61K38/01;A61P35/00 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 何淑珍 |
| 地址: | 511400 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明提供铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用,其方法为:将铁皮石斛粉加入缓冲溶液,硫酸氨沉淀,透析冷冻干燥,得蛋白质粉末;再溶解,配成铁皮石斛蛋白液,分别加入3种蛋白酶,即碱性蛋白酶Alcalase2.4L、碱性蛋白酶37017和胰蛋白酶,酶解,得三种酶解液;进行凝胶色谱柱层析,水洗脱,收集得到9个多肽组分,即铁皮石斛抗肿瘤多肽。所得产品A3对肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901和乳腺癌细胞MCF-7的半抑制浓度IC50分别为:169.62µg/mL、155.20µg/mL、107.53µg/mL。本发明得到的铁皮石斛多肽有利于功能食品和医药领域的开发利用。 | ||
| 搜索关键词: | 铁皮 石斛 肿瘤 多肽 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法,其特征在于,所述制备方法为:(1)将铁皮石斛粉加入缓冲溶液PBS中浸泡提取蛋白, 硫酸氨沉淀,透析冷冻干燥,得到蛋白质粉末;(2)取步骤(1)所得蛋白质粉末溶解于蒸馏水, 配成铁皮石斛蛋白液, 分别加入3种蛋白酶,即碱性蛋白酶Alcalase 2.4L、碱性蛋白酶37017和胰蛋白酶, 在控制条件下进行酶解, 得到三种酶解液;(3)取步骤(2)得到的三种酶解液,再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶Sephadex G‑25柱层析,水洗脱,在检测波长280nm下收集得到9个多肽组分,即铁皮石斛抗肿瘤多肽。
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