[发明专利]一种DNA扩增方法有效
| 申请号： | 201410448896.X | 申请日： | 2014-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN105463066B | 公开（公告）日： | 2019-05-17 |
| 发明（设计）人： | 阮珏;王开乐;沈栩;吕雪梅;吴仲义 | 申请（专利权）人： | 中国科学院北京基因组研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京思格颂知识产权代理有限公司 11635 | 代理人： | 李中奎 |
| 地址： | 100101 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种DNA扩增方法，其特征在于，所述扩增方法包括将T7启动子序列添加到目标DNA末端的步骤。本发明所提供的扩增方法，可以基于痕量DNA，小于1纳克DNA甚至单细胞基因组DNA进行扩增；含有T7启动子序列的目标DNA实现了相对均匀的扩增；可有效去除扩增过程产生的错误。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dna 扩增 方法 | ||
【主权项】：
1.一种DNA扩增方法，其特征在于，所述扩增方法包括用转座子将末端带有T7启动子序列的接头通过转座的方式插入基因组DNA，从而将T7启动子序列添加到目标DNA片段的末端的步骤；其中所述基因组DNA为小于1纳克的痕量DNA；其中所述转座子由Ez‑Tn5转座酶和基因序列组装而成，且所述基因序列由末端带有T7启动子序列的镶嵌末端和镶嵌末端的互补序列组成，所述末端带有T7启动子序列的镶嵌末端的序列如SEQ ID NO:3所示，镶嵌末端的互补序列如SEQ ID NO:4所示，所述转座子通过合成Ez‑Tn5转座酶能识别的末端带有T7启动子序列的镶嵌末端及镶嵌末端的互补序列，将两条序列退火后与Ez‑Tn5转座酶组装而成。
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