[发明专利]一种以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法

摘要

一种以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法，包括以下步骤：（1）筛选虫草菌菌株；（2）准备蚯蚓：收集活蚯蚓，用于培育蛹虫草子实体，晾干作宿主；（3）制作菌悬液：将出发菌株接种于PDA培养基平板上培养，并接种于一种液体培养基内培养，得到菌悬液；（4）接种：在无菌操作台内，吸取菌悬液注入宿主尾部或口器；（5）子座的培育：将接种蚯蚓放于无菌的玻璃瓶中，保护至其僵硬；然后将僵硬的蚯蚓置于自然光照的无菌培养室中培养，得到成熟子座；（6）收集保存虫草：将成熟子座收集烘干，置阴凉干燥处密封保存。该方法所得蛹虫草口感独特，营养价值高，具有很好的保健功能，可以适合各年龄阶段人群；同时显著提高蚯蚓的附加值。

主权项

一种以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）筛选虫草菌菌株：在20‑23℃以及相对湿度65%的条件下，将蛹虫草菌株接种于一种平板培养基上，该平板培养基的配方是蚯蚓粉末20g‑40g、葡萄糖20g‑40g和琼脂15g‑20g，三者加水混合至体积1000mL，pH值自然，待菌丝体长满平板，反复筛选直至获得子座长度最长且性状稳定的蛹虫草纯菌株，以筛选的上述菌株作为出发菌株；（2）准备蚯蚓：收集活蚯蚓，用于培育蛹虫草子实体；在无菌操作台内，将活蚯蚓用75％酒精消毒8分钟‑10分钟，用无菌水冲洗5‑6次，晾干作宿主；（3）制作菌悬液：将出发菌株接种于PDA培养基平板上，置于20℃下培养，待长满菌丝后，挑取一块菌块接种于一种液体培养基内培养，培养4‑5天，得到菌悬液；所述液体培养基的配方为马铃薯150g‑300g，葡萄糖20g‑40g，加水至体积1000mL，pH值自然；（4）接种：在无菌操作台内，用无菌注射器吸取菌悬液注入宿主尾部或口器，每只蚯蚓的注入量为0.1毫升‑0.15毫升，注射深度为0.1厘米‑0.2厘米；（5）子座的培育：将接种蚯蚓放于无菌的玻璃瓶中，20℃下保护至其僵硬；然后将僵硬的蚯蚓置于15‑25℃、空气相对湿度为85‑95％的自然光照的无菌培养室中培养4周，得到成熟子座；（6）收集保存虫草：将成熟子座收集，放在60℃环境下烘干1‑5小时，置阴凉干燥处密封保存。