[发明专利]一种以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法，属于药用菌栽培技术领域。 

背景技术

冬虫夏草是我国的一种名贵中药，由于它需要特殊的生长条件，生长期较长，因而在自然界中的数量十分稀少，目前市场价格达到每千克4万元左右。冬虫夏草列为国家二级保护物种，各地政府也出台政策禁挖、限挖，但对冬虫夏草的采挖并未得到遏制。蛹虫草是名贵的中药材，是冬虫夏草很好的替代品，具有很高的滋补保健价值和药用价值，而且蛹虫草和冬虫夏草在生物分类上同属于子囊菌纲肉座菌目麦角菌科虫草属。 

冬虫夏草菌寄生于蝙蝠蛾幼虫而形成，但现如今大部分蛹虫草都是利用大米粉等廉价培养基培育，如中国专利文献CN102428830A公开的《蛹虫草人工栽培技术》，CN103044119A公开的《一种蛹虫草培养基及其制备方法和应用》，CN103503689A公开的《一种利用豆渣栽培蛹虫草的方法及其培养基》，CN103539498A公开的《一种蛹虫草培养基及其应用》等，但是这些技术不能很好的模拟冬虫夏草菌的实际生长环境，所得虫草营养成份有限。 

所以，很多学者尝试采用黄粉虫和鸡蛋等培养基来培育蛹虫草，所得的蛹虫草和冬虫夏草药化成分及药理功能都非常相近。如CN102907256B公开的《一种柞蚕蛹虫草盒式培养方法》，包括蚕蛹清洗、消毒、接种、虫草培养，菌种用PDA液体培养基培养，培养基高温灭菌接种后摇床23℃左右培养至培养液较粘稠并有菌球出现，培养好的液体菌种过滤至无菌瓶内，菌球用菌液体积0.5-1倍的无菌水冲洗2-3次，整个过程无菌操作。接种时用注射器吸取菌液，从蚕蛹尾部数第二节处注射；接种后单层摆放于消过毒的培养室内，接种处变干结痂，转移到灭过菌的塑料盒内培养，至尾部僵化变硬、环节处有菌丝出现时摆放在有通气孔盒内，保持温、湿度，直至长出蛹虫草，采收，烘干。该方法温、湿度易控制、调节，能充分光照，易采收，虫草培养时间短、操作方便、出草整齐，成功率高达95％以上，虫草商品性好。 

蚯蚓，中药称地龙，其味咸性寒，功能为清热、镇痉、止喘、利尿。主治高热狂躁、惊风抽搐、头痛目赤、喘息痰热、中风、半身不遂等病证。地龙提取液有良好的定咳平喘的作用。蚯蚓灰与玫瑰油混合能治秃发。蚯蚓也具有很好的营养价值，据测定，蚯蚓的蛋白质含量约占干重的53.5％-65.1％，脂肪含量约为4.4％-17.38％，碳水化合物约为11％-17.4％，水分7.8％-23％。蚯蚓体内还含有丰富的维生素D(约占鲜体重的0.04％-0.073％)，以及钙和磷(约占鲜体重的0.124％-0.188％)等矿物质元素。蚯蚓体内含有地龙素、地龙解毒素、黄嘌呤、抗组织胺和维生素B等多种药用成分。鉴于以上蚯蚓药食两用的特点，本发明首次尝试采用蚯蚓为载体培育蛹虫草。 

CN101205519公开了一种《以地鳖虫为培养基培育蛹虫草的方法》，把地鳖虫进行粉碎与蚕蛹粉混合，配比为地鳖虫粉50－100％，蚕蛹粉0－50％，加水为1∶1.2－1.4，混合后装入容器，灭菌，接入蛹虫草菌种在一定的温度湿度等条件下，培养长出蛹虫草子实体。地 鳖虫的营养成份，与蚕蛹相似，但地鳖虫含有许多药用成份，这就使培育出的地鳖虫蛹虫草，不但具有蛹虫草的药效同时具有地鳖虫的药效。 

蚯蚓与地鳖虫特性不同，以地鳖虫为培养基培育蛹虫草的方法不能适用于以蚯蚓为载体的蛹虫草培养。目前，尚未有记载以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的文献。 

发明内容

本发明针对现有蛹虫草培养技术存在的不足以及尚没有以蚯蚓为载体培育蛹虫草的问题，提供一种能够制备成本低廉的蚯蚓蛹虫草的以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法，所得蚯蚓蛹虫草口感独特、营养丰富、保健功能强。 

本发明的以蚯蚓为载体培养人工蛹虫草的方法，包括以下步骤： 

(1)筛选虫草菌菌株：在20-23℃以及相对湿度65％的条件下，将蛹虫草菌株(任何蛹虫草均可以)接种于一种平板培养基上，该平板培养基的配方是蚯蚓粉末20g-40g、葡萄糖20g-40g和琼脂15g-20g，三者加水混合至体积1000mL，pH值自然，密封121℃灭菌20分钟，待菌丝体长满平板，反复筛选直至获得子座长度最长且性状稳定的蛹虫草纯菌株，以筛选的上述菌株作为出发菌株； 

(2)准备蚯蚓：收集活蚯蚓，用于培育蛹虫草子实体；在无菌操作台内，将活蚯蚓用75％酒精消毒8分钟-10分钟，用无菌水冲洗5-6次，晾干作宿主；