[发明专利]完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法有效

专利信息
申请号: 201410387213.4 申请日: 2014-08-07
公开(公告)号: CN104186460A 公开(公告)日: 2014-12-10
发明(设计)人: 孙黎;张弓;王通;金静洁 申请(专利权)人: 暨南大学
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02
代理公司: 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人: 苏运贞;陈燕娴
地址: 510632 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法是在正常生长的细胞培养液中加入翻译延伸抑制剂,待翻译延伸抑制剂有效作用于RNC,抑制翻译延伸的进行后,将细胞冷却至0~4℃,再用预冷至0~4℃的PBS溶液清洗细胞以及加入细胞中,液氮中快速冷冻,超低温保存,于冰上解冻,再抽提RNC。本发明通过采用翻译延伸抑制剂有效固定核糖体,使之不易解离,将细胞内的翻译状况固定下来;再通过液氮急冻方法有效地冷冻保存RNC长期储存和运输,并且解冻后所提取的RNC与新鲜细胞提取的RNC无异,因此本发明突破了时间和空间的限制,为研究RNC及开展RNC商业服务提供了便利。
搜索关键词: 完整 冷冻 保存 解冻 细胞内 核糖体 新生 复合物 方法
【主权项】:
一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法,其特征在于包括如下步骤:首先通过翻译延伸抑制剂抑制细胞的翻译活动,然后去除培养液,清洗细胞,再将清洗后的细胞用液氮进行快速冷冻处理,接着将快速冷冻处理好的细胞置于不高于‑80℃的环境下保存;使用时将细胞转移至冰上解冻即可。
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