[发明专利]一种利用酵母菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法

摘要

本发明公开了一种利用酵母菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法，通过改善种子培养基和发酵培养基配方，并在特定时间添加蔗糖和前体L-蛋氨酸，使酵母菌发酵产生大量的腺苷蛋氨酸，腺苷蛋氨酸的发酵水平可达到16g/L以上，生物量干重达到170g/L以上。另外，通过加入三氯乙酸进行破壁，使细胞壁破碎率达到99％以上，从而使腺苷蛋氨酸得到充分释放。通过采用苦味酸对腺苷蛋氨酸进行提取，使腺苷蛋氨酸的沉淀得率在95％以上。通过萃取及树脂脱色等步骤，使腺苷蛋氨酸产品纯度大于98％。本发明具有生产工艺简单、生产成本低、过程易控制且无污染、腺苷蛋氨酸得率高且质量稳定等优点，适合腺苷蛋氨酸的大规模工业化生产。

主权项

一种利用酵母菌发酵生产腺苷蛋氨酸的方法，其特征在于，将高表达腺苷蛋氨酸的酵母菌种接入发酵培养基进行好氧发酵培养，并在培养至9‑11h时添加蔗糖至蔗糖终浓度为40‑45g/L，在培养至23‑25h时开始以1.5g/h的速率连续流加前体L‑蛋氨酸直至发酵完成，得到含有高发酵水平腺苷蛋氨酸的发酵液；此外，还包括以下步骤：步骤一、细胞破壁，将所得发酵液与一定的浓度为15‑30％的酸溶液按照体积比0.8‑1.0∶1.0混合，并于3‑4℃保持2‑3h，进行沉淀分层后取上层清液得到腺苷蛋氨酸粗提液；步骤二、沉淀提取，将所得腺苷蛋氨酸粗提液与一定量的苦味酸溶液混合，并调节pH值为2.8‑2.9，进行沉淀分层后得到腺苷蛋氨酸沉淀；步骤三、纯化，将所得腺苷蛋氨酸沉淀进行萃取和脱色既得所述腺苷蛋氨酸。