[发明专利]一种多倍体毛茛铁线莲的培育方法

摘要

本发明提供一种多倍体毛茛铁线莲的培育方法，对种子筛选、处理，接入生长培养基进行培养催芽，再用秋水仙碱溶液浸泡种子，然后用无菌水冲洗干净，再接种于上述生长培养基中，然后将形态上明显变异的幼苗转入生长培养基中继续培养诱导出新的芽苗，如此循环，使变异幼苗经过5代繁殖，再进行多倍体检测，将鉴定为多倍体的幼苗转接于生根培养基进行生根培养，待幼苗基部长出根后进行移栽，即得到毛茛铁线莲多倍体植株。本发明利用组织培养和秋水仙碱诱变相结合的方式，可以有效降低嵌合体的比例，改变毛茛铁线莲花朵较小的特性，选育出大花型的新品种，同时保持母本优良性状，能有效提高毛茛铁线莲多倍体诱导效率，实现多倍体比率达23.6%。

主权项

一种多倍体毛茛铁线莲的培育方法，其特征在于经过下列各步骤：（1）对毛茛铁线莲种子进行筛选，再对种子进行处理，然后将处理过的种子接入生长培养基：MS+6‑BA 2mg/L+ NAA 0.5mg/L+AgNO₃ 3mg/L，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行培养催芽；（2）待步骤（1）的种子长出4～6mm的胚根或胚芽时，用质量浓度为0.05%～0.15%无菌的秋水仙碱溶液浸泡种子6～18h，然后用无菌水冲洗干净，再吸掉水分后接种于上述生长培养基中，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行培养30～35天，然后将形态上明显变异的幼苗转入上述生长培养基中以相同的条件继续培养30～35天，诱导出新的芽苗，对变异的幼苗再继续转入上述生长培养基中以相同的条件进行培养，如此循环，使变异幼苗经过5代繁殖；（3）将步骤（3）经过5代繁殖的幼苗按常规进行多倍体检测，将鉴定为多倍体的幼苗转接于生根培养基：1/2MS+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L+AC 0.25g/L中，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行生根培养，待幼苗基部长出0.5～1.0cm的根后进行移栽，即得到毛茛铁线莲多倍体植株。