[发明专利]一种多倍体毛茛铁线莲的培育方法

权利要求书

1.一种多倍体毛茛铁线莲的培育方法，其特征在于经过下列各步骤：

（1）对毛茛铁线莲种子进行筛选，再对种子进行处理，然后将处理过的种子接入生长培养基：MS+6-BA 2mg/L+ NAA 0.5mg/L+AgNO₃ 3mg/L，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行培养催芽；

（2）待步骤（1）的种子长出4～6mm的胚根或胚芽时，用质量浓度为0.05%～0.15%无菌的秋水仙碱溶液浸泡种子6～18h，然后用无菌水冲洗干净，再吸掉水分后接种于上述生长培养基中，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行培养30～35天，然后将形态上明显变异的幼苗转入上述生长培养基中以相同的条件继续培养30～35天，诱导出新的芽苗，对变异的幼苗再继续转入上述生长培养基中以相同的条件进行培养，如此循环，使变异幼苗经过5代繁殖；

（3）将步骤（3）经过5代繁殖的幼苗按常规进行多倍体检测，将鉴定为多倍体的幼苗转接于生根培养基：1/2MS+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L+AC 0.25g/L中，在温度为22～26℃、光照强度为1500±200Lx、相对湿度为70％±5％的条件下进行生根培养，待幼苗基部长出0.5～1.0cm的根后进行移栽，即得到毛茛铁线莲多倍体植株。

2.根据权利要求1所述的多倍体毛茛铁线莲的培育方法，其特征在于：所述步骤（1）的筛选是去除空瘪种子和杂质，留饱满种子备用，以确保种子质量，提高种子发芽率。

3.根据权利要求1所述的多倍体毛茛铁线莲的培育方法，其特征在于：所述步骤（1）的对种子进行处理是将毛茛铁线莲种子用质量浓度为0.5%的高锰酸钾溶液浸泡消毒6h，再用水冲洗干净后，用浓度为1%升汞处理3～5min。