[发明专利]一种当归细胞超低温保存及植株再生的方法有效
申请号: | 201410369174.5 | 申请日: | 2014-07-31 |
公开(公告)号: | CN104126570A | 公开(公告)日: | 2014-11-05 |
发明(设计)人: | 晋玲;张延红;李应东;姬菊梅 | 申请(专利权)人: | 甘肃中医学院 |
主分类号: | A01N3/00 | 分类号: | A01N3/00;A01H4/00 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 高松 |
地址: | 730000 甘*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明提供一种当归细胞超低温保存方法,步骤如下:(1)将生长旺盛的当归悬浮培养细胞装载处理;(2)将装载处理后的当归悬浮培养细胞用玻璃化溶液脱水处理;(3)将脱水处理后的当归悬浮培养细胞迅速投入液氮中进行超低温保存;(4)当需要使用悬浮细胞时,从液氮中取出,解冻,用卸载液卸载20min。本发明还提供超低温保存后的当归细胞的植株再生方法,是将解冻并卸载后的悬浮细胞接种到培养基上光照培养;之后转至成苗培养基中继续培养,培养条件为:光照强度1500LX,光照时间14h/d,培养温度20℃。本发明的方法简单易行,保存成活率高达100%,恢复培养时可快速增殖,并分化出较多的当归幼苗。 | ||
搜索关键词: | 一种 当归 细胞 超低温 保存 植株 再生 方法 | ||
【主权项】:
一种当归细胞超低温保存方法,其步骤如下:(1)将生长旺盛的当归悬浮培养细胞装载处理;(2)将装载处理后的当归悬浮培养细胞用玻璃化溶液脱水处理;(3)将脱水处理后的当归悬浮培养细胞迅速投入液氮中进行超低温保存;(4)当需要使用悬浮细胞时,从液氮中取出,解冻,用卸载液卸载,卸载一次,卸载20min,所述卸载液的配方为:每升1/2MS培养液附加1.2mol蔗糖;(5)恢复培养:吸干卸载液,以0.9‑1.1cm大小的细胞团块接种于恢复生长培养基中恢复生长,培养温度23℃,光强2000lx、光照时间12h/d。
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