[发明专利]一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用有效

专利信息
申请号: 201410323568.7 申请日: 2014-07-07
公开(公告)号: CN105238764B 公开(公告)日: 2018-11-20
发明(设计)人: 刘正飞;张美美;陈焕春;王昕 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12N7/00 分类号: C12N7/00;A61K39/245;A61P31/22;C12R1/93
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 王敏锋
地址: 430070 *** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种伪狂犬病毒LLT区ΔIntron株及构建方法和应用,步骤是:A、Intron上下游同源臂的PCR扩增;B、转染载体的构建。将Intron基因上下游同源臂片段通过分子克隆技术克隆至pcDNA3.1(+)载体上;C、PRV‑ΔIntron重组病毒的构建与鉴定;D、PRV‑ΔIntron重组病毒体外培养生物学特性。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株接种PK‑15细胞;E、动物实验。将制备的伪狂犬病毒ΔIntron基因缺失毒株感染Balb/c小鼠,Intron的缺失导致其毒力大大降低。该毒株表达miRNA的区域缺失,丧失了对宿主和自身蛋白质编码基因的调控作用,导致毒力下降,具有开发成为新型疫苗的潜在价值。方法易行,操作简便,缺失区域遗传稳定,不会返强。用于制备新型伪狂犬病疫苗,预防和控制猪伪狂犬病。
搜索关键词: 一种 狂犬病毒 llt intron 构建 方法 应用
【主权项】:
1.一种LLT区Intron基因缺失标志伪狂犬病毒活毒株,其特征在于:伪狂犬病毒株PRV‑ Δ Intron,保藏编号为CCTCC NO:V201422。
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