[发明专利]一种用于皮肤衰老修复的间充质干细胞的条件培养基制剂

摘要

本发明公开了用于修复皮肤衰老的间充质干细胞条件培养基制剂，其制备方法包括常规条件下培养间充质干细胞至其生长密度为60%~80%，然后进行换液处理，使用无酚红的DMEM培养基培养，并加入黄芪甲苷，在培养箱中继续诱导培养24h，培养完毕后去除分子量3000以下的细胞因子，进行浓缩，并对培养基中的细胞因子进行检测，并在浓缩后的培养基溶液中加入0.01mg/ml~0.6mg/ml的还原型谷胱甘肽和0.01%~0.4%的透明质酸。条件培养基制剂中富含多种细胞生长因子，黄芪甲苷可以保持干细胞特性并刺激其分泌各种因子能力；透明质酸避免了细胞因子半衰期短和疗效时间短的弊端，提高皮肤修复效果。

主权项

一种用于皮肤衰老修复的间充质干细胞的条件培养基制剂，其制备方法包括以下步骤：A、选取具有活性的间充质干细胞，在常规条件下培养间充质干细胞至其生长密度为60％～80％，然后进行换液处理，使用PBS溶液清洗；B、在清洗后的间充质干细胞中加入无酚红的DMEM培养基和培养基总体积0.1umol/L～1umol/L的黄芪甲苷，在培养箱中继续诱导培养20h～28h，培养完毕后将间充质干细胞的培养基使用高效滤网过滤，去除分子量3000以下的细胞因子；C、经过高效滤网后的培养基溶液形成浓缩液，并对培养基浓缩液中的细胞因子进行检测，检测细胞因子VEGF、IGF‑1、HGF、EGF和FGF的含量；D、在浓缩后的培养基溶液中加入0.01mg/ml～0.6mg/ml的还原型谷胱甘肽和0.01％～0.4％的透明质酸；所述步骤A中的常规条件为，使用的培养基为DMEM培养基，其培养温度为35℃～39℃，培养体系含有4％～6％的二氧化碳；所述步骤B中的低氧诱导培养条件为，0.1umol/L～1umol/L的黄芪甲苷，培养温度为35℃～39℃，培养体系含有4％～6％的二氧化碳。