[发明专利]树突状细胞疫苗的制备方法

摘要

本发明属于细胞免疫领域，具体地说是一种树突状细胞疫苗的制备方法，包括从脐血中分离得到脐血单核细胞；从中筛选出DC细胞，培养并扩增，然后进行单表位多聚抗原肽（SEA-MVP）负载，并孵育过夜得到DC疫苗。本发明的有益效果在于选用单表位多聚抗原肽（SEA-MAP）负载DC细胞，单表位多聚抗原肽为体外合成，成份明确单一，纯度高；碱性氨基酸作骨架将单表位连接成，使连接的表位肽的朝向具有一致性易被DC细胞识别呈递，敏感性特异性强，负载有效率高，无免疫耐受；对激活CD4+细胞和CD8+细胞抗肿瘤细胞的能力较现有方法至少提高万倍以上。

主权项

树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）从脐血中分离得到脐血单核细胞；（2）用含1%FBS的RPMI‑1640培养基贴壁培养脐血单核细胞，去除未贴壁细胞，向贴壁细胞中加入含有GM‑CSF、IL‑4、双抗和10%FBS的RPMI‑1640培养基，继续培养；三天后补加半量的所述RPMI‑1640培养基；（3）第6天，将细胞混匀，换用含有1%FBS、GM‑CSF、IL‑4、IL‑6、IL‑1β和TNF‑α（肿瘤坏死因子‑α）的培养基，同时进行单表位多聚抗原肽（SEA‑MVP）负载，并孵育过夜；（4）第7天，进行常规检测后制备DC疫苗注射液。