[发明专利]一种单链DNA核酸适配体修饰二氧化硅/四氧化三铁磁性微球的制备方法

摘要

本发明公开了一种单链DNA核酸适配体修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球的制备方法，按以下步骤进行：(1)采用化学共沉淀法得到Fe₃O₄磁性纳米粒子；(2)采用溶胶凝胶法得SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；(3)得-NH₂基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；(4)将-NH₂基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球分散于水中，得-COOH基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；(5)将-COOH基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球分散于Tris-HCl缓冲溶液中，得核酸适配体修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球。

主权项

一种单链DNA核酸适配体修饰二氧化硅/四氧化三铁磁性微球的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行：（1）采用化学共沉淀法合成Fe₃O₄纳米粒子，用油酸对其改性，得到粒径均一、分散性好并具有超顺磁性的Fe₃O₄磁性纳米粒子；（2）采用溶胶凝胶法对步骤（1）制得的Fe₃O₄磁性纳米粒子进行SiO₂包覆，得到粒径均匀、分散性好并具有超顺磁性的SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；（3）将步骤（2）制得的SiO₂/Fe₃O₄磁性微球分散于无水乙醇中，加入APTES，对磁性微球表面进行氨基改性，得到‑NH₂基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；（4）将步骤（3）制得的‑NH₂基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球分散于水中，加入DTPA，在EDC和NHS作用下，通过酰胺反应得到‑COOH基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球；（5）将步骤（4）制得的‑COOH基修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球分散于Tris‑HCl(20mmol/L tris,100mmol/LNaCl,5mmol/L MgCl₂)缓冲溶液中，加入EDC、NHS及核酸适配体溶液，室温下反应后，磁分离后用Tris‑HCl溶剂多次清洗，磁分离，得到核酸适配体修饰SiO₂/Fe₃O₄磁性微球，分散于Tris‑HCl溶剂中保存。