[发明专利]用于人类药物致聋基因突变筛查的引物、探针及其使用方法

摘要

本发明公开了用于人类药物致聋基因突变筛查的引物、探针及其使用方法，属于基因检测技术领域。本发明公开了32种用于人类药物致聋基因突变筛查的引物和探针的组合，以及这32种用于人类药物致聋基因突变筛查的引物和探针的组合在的应用方法。本发明提供的引物和探针组合以及其使用方法，可以在同一次PCR反应中检测多个样本，相比传统的检测方法具有准确率高、步骤少，耗时少的优点。

主权项

一种用于人类药物致聋基因突变mtDNA‑M1和mtDNA‑M2筛查的引物和探针，其特征在于，所述的引物和探针如下：所述的引物为Primer‑F和Primer‑R，所述的探针为Probe；Primer‑F、Primer‑R和Probe选自如下任意一种组合：第1种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第2种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第3种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第4种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第5种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第6种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第7种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第8种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第9种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第10种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第11种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第12种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第13种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第14种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第15种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第16种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第17种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第18种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第19种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第20种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第21种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第22种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第23种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第24种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第25种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第26种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第27种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第28种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第29种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第30种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；第31种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的DNA序列；第32种组合：Primer‑F为序列表中SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5所示的DNA序列；Primer‑R为序列表中SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.7所示的DNA序列；Probe为序列表中SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.11所示的DNA序列；其中，所述的人类药物致聋基因突变mtDNA‑M1为线粒体DNA的1494C>T突变；所述的人类药物致聋基因突变mtDNA‑M2为线粒体DNA的1555A>G突变。