[发明专利]链霉亲和素突变蛋白及其使用方法有效
| 申请号： | 201380070706.9 | 申请日： | 2013-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN105073770B | 公开（公告）日： | 2019-08-06 |
| 发明（设计）人： | 托马斯·施密特 | 申请（专利权）人： | IBA股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/36 | 分类号： | C07K14/36 |
| 代理公司： | 北京瑞恒信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11382 | 代理人： | 曹津燕;王瑞琳 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 德国;DE |
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| 摘要： | 本发明涉及新的链霉亲和素突变蛋白。在一个实施方案中，该突变蛋白(a)包含至少一个在与如SEQ ID NO:15所示野生型链霉亲和素的氨基酸序列相关的氨基酸位点115至121的区域中的突变，以及(b)对于包含氨基酸序列Trp‑Ser‑His‑Pro‑Gln‑Phe‑Glu‑Lys(SEQ ID NO:100)的肽配体，具有比以下各蛋白更高的结合亲和力：(i)包含氨基酸序列Val44‑Thr45‑Ala46‑Arg47(SEQ ID NO:98)的链霉亲和素突变蛋白，或者(ii)在氨基酸位点44至47包含氨基酸序列Ile44‑Gly45‑Ala46‑Arg47(SEQ ID NO:99)的链霉亲和素突变蛋白，或者(iii)野生型链霉亲和素(SEQ ID NO:15)。 | ||
| 搜索关键词： | 亲和 突变 蛋白 及其 使用方法 | ||
【主权项】：
1.一种突变蛋白，其选自链霉亲和素的突变蛋白，其中，所述突变蛋白(a)包含至少两个在与氨基酸残基14至139示于SEQ ID NO:212的野生型链霉亲和素的氨基酸序列相关的氨基酸位点117至121的区域中的突变，以及(b)对于包含氨基酸序列Trp‑Ser‑His‑Pro‑Gln‑Phe‑Glu‑Lys(SEQ ID NO:100)的肽配体，具有比以下各蛋白更高的结合亲和力(i)包含氨基酸序列Val44‑Thr45‑Ala46‑Arg47(SEQ ID NO:98)的SEQ ID NO:112的链霉亲和素突变蛋白，或者(ii)在氨基酸位点44至47包含氨基酸序列Ile44‑Gly45‑Ala46‑Arg47(SEQ ID NO:99)的SEQ ID NO:113的链霉亲和素突变蛋白，或者(iii)氨基酸残基示于SEQ ID NO:212的野生型链霉亲和素，其中所述突变蛋白在序列位置117至121包含以下氨基酸序列：如SEQ ID NO:21所示的Tyr117Asn118Ala119Phe120Met121，如SEQ ID NO:22所示的Tyr117Asn118Ala119Tyr120Ala121，如SEQ ID NO:23所示的Ala117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Tyr121，如SEQ ID NO:33所示的Tyr117Asn118Ala119Gly120Phe121，如SEQ ID NO:55所示的Gly117Asn118Ala119Met120Met121，如SEQ ID NO:56所示的Glu117Asn118Ala119Gly120Phe121，如SEQ ID NO:57所示的Asp117Asn118Ala119Gly120Tyr121，如SEQ ID NO:58所示的Glu117Asn118Ala119Gly120Tyr121，如SEQ ID NO:59所示的Arg117Asn118Ala119Met120Met121，如SEQ ID NO:60所示的Arg117Asn118Ala119Gly120Phe121，如SEQ ID NO:61所示的Ala117Asn118Ala119Pro120Ala121，如SEQ ID NO:62所示的Ala117Asn118Ala119Met120Val121，如SEQ ID NO:63所示的Gln117Asn118Ala119Ser120Ala121，如SEQ ID NO:64所示的Ala117Asn118Ala119Gly120Phe121，如SEQ ID NO:65所示的Gln117Asn118Ala119Met120Val121，如SEQ ID NO:75所示的Tyr117Asn118Ala119Phe120Leu121，如SEQ ID NO:76所示的Phe117Asn118Ala119Phe120Leu121，如SEQ ID NO:77所示的Tyr117Asn118Ala119Leu120Trp121，如SEQ ID NO:82所示的Thr117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Leu121，如SEQ ID NO:83所示的His117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Leu121，如SEQ ID NO:84所示的Ile117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Arg121，如SEQ ID NO:85所示的His117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Thr121，如SEQ ID NO:86所示的Thr117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Arg121，如SEQ ID NO:87所示的Ala117‑‑‑118‑_‑119Trp120Arg121，如SEQ ID NO:93所示的Ala117‑_‑118‑_‑119Trp120Tyr121，如SEQ ID NO:94所示的His117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Met121，如SEQ ID NO:95所示的His117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Tyr121，如SEQ ID NO:96所示的Glu117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Tyr121，或如SEQ ID NO:97所示的Gln117‑‑‑118‑‑‑119Trp120Tyr121。
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