[发明专利]链霉亲和素突变蛋白及其使用方法

权利要求书

1.一种突变蛋白，其选自链霉亲和素的突变蛋白，其中，所述突变蛋白

(a)包含至少两个在与氨基酸残基14至139示于SEQ ID NO:212的野生型链霉亲和素的氨基酸序列相关的氨基酸位点117至121的区域中的突变，以及

(b)对于包含氨基酸序列Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys(SEQ ID NO:100)的肽配体，具有比以下各蛋白更高的结合亲和力

(i)包含氨基酸序列Val⁴⁴-Thr⁴⁵-Ala⁴⁶-Arg⁴⁷(SEQ ID NO:98)的SEQ ID NO:112的链霉亲和素突变蛋白，或者

(ii)在氨基酸位点44至47包含氨基酸序列Ile⁴⁴-Gly⁴⁵-Ala⁴⁶-Arg⁴⁷(SEQ ID NO:99)的SEQ ID NO:113的链霉亲和素突变蛋白，或者

(iii)氨基酸残基示于SEQ ID NO:212的野生型链霉亲和素，

其中所述突变蛋白在序列位置117至121包含以下氨基酸序列：

如SEQ ID NO:21所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:22所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Tyr¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:23所示的Ala¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:33所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:55所示的Gly¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:56所示的Glu¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:57所示的Asp¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:58所示的Glu¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:59所示的Arg¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:60所示的Arg¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:61所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Pro¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:62所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Val¹²¹，

如SEQ ID NO:63所示的Gln¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Ser¹²⁰Ala¹²¹，

如SEQ ID NO:64所示的Ala¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Gly¹²⁰Phe¹²¹，

如SEQ ID NO:65所示的Gln¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Met¹²⁰Val¹²¹，

如SEQ ID NO:75所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:76所示的Phe¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Phe¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:77所示的Tyr¹¹⁷Asn¹¹⁸Ala¹¹⁹Leu¹²⁰Trp¹²¹，

如SEQ ID NO:82所示的Thr¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:83所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Leu¹²¹，

如SEQ ID NO:84所示的Ile¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:85所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Thr¹²¹，

如SEQ ID NO:86所示的Thr¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:87所示的Ala¹¹⁷---¹¹⁸-_-¹¹⁹Trp¹²⁰Arg¹²¹，

如SEQ ID NO:93所示的Ala¹¹⁷-_-¹¹⁸-_-¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:94所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Met¹²¹，

如SEQ ID NO:95所示的His¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，

如SEQ ID NO:96所示的Glu¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹，或

如SEQ ID NO:97所示的Gln¹¹⁷---¹¹⁸---¹¹⁹Trp¹²⁰Tyr¹²¹。