[发明专利]蔓越莓木葡聚糖低聚糖组合物

摘要

一种由蔓越莓花萼经酶处理的组合物制备的组合物，其能减少或抑制微生物与具有用于粘附的α‑Gal‑(1‑4)‑Gal末端低聚糖受体的细胞的粘附。

主权项

1.一种抗微生物粘附的组合物，包含有效量的分离自蔓越莓的抗微生物的粘附抑制性级分A6作为活性成分，其中所述分离的级分含有乙酰化、富含中性糖的多糖，所述多糖的重均摩尔质量为10.2×103±2.0Da，Z平均流体力学半径为2.0±0.2nm，重量–平均特征粘度为0.048±0.0001dL/g，所述组合物通过包括以下步骤的方法制备：(a)提供蔓越莓花萼，(b)用足量的与Klerzyme 150果胶酶的家族等效的果胶酶处理所述蔓越莓花萼，从而使所述花萼脱果胶以形成酶处理的组合物，(c)使用倾析或离心的方法从所述酶处理的组合物中去除碎片，以形成第一液体，(d)对所述第一液体进行喷雾干燥以形成组合物A1，(e)用去离子水溶解所述组合物A1并将其加样至来自Biotage FLASH‑40色谱系统的柱中，该系统改为接收装有SNAP KP‑C18‑HS 12g样品的、用甲醇和水预平衡的Biotage SNAP KP‑C18‑HS 120g柱，(f)通过先用去离子水接着用甲醇/水混合物对柱进行洗脱来对所述组合物A1进行分级分离，从而得到组合物A2，(g)重复步骤(f)4次，(h)通过首先真空去除甲醇，对所述组合物A2进行冷冻干燥，(i)使用示差折光检测，分析在A2级分中观察到的从HPX‑87C HPLC柱在6.7min时洗脱的峰，(j)使用LH 20凝胶柱层析对组合物A2进行纯化，通过首先将A2级分溶解在去离子水中，将其加样在LH 20柱中，在使用Masterflex L/S泵‑型号为7014‑52以2.5ml/min的流速用去离子水对柱进行洗脱之后，得到所述的抗微生物的粘附抑制性级分A6，(k)冷冻干燥所述抗微生物的粘附抑制性级分A6，从而得到结晶粉末，以及(l)将所述结晶粉末与载体混合从而提供抗微生物粘附的组合物。