[发明专利]一种快速鉴定月季对白粉病抗性的方法

摘要

发明提供一种快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，以新鲜、健康、完整的月季嫩叶作为侵染材料，套袋隔离处理两周，收集白粉菌并调配成孢子悬浮液，然后对侵染材料进行接种、染色、制片，最后病情观察及病情指数统计，即得到该月季嫩叶对白粉病的抗性。通过本发明能准确、快速鉴别出不同基因型月季对白粉病的抗性情况，有效缩短了鉴定周期，且操作简单，可用于月季杂交育种后代种子的苗期快速抗性鉴定。

主权项

一种快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，其特征在于经过下列各步骤：（1）以新鲜、健康、完整的月季嫩叶作为侵染材料，用纸袋将嫩叶套袋隔离两周；（2）将新采集的月季白粉病菌孢子放入灭菌蒸馏水中，调配成孢子含量数为1×104~1×105/ml的分生孢子悬浮液；（3）取步骤（1）的月季嫩叶洗净并吸干表面水份，在每片嫩叶反面以滴液的方式，接种步骤（2）的分生孢子悬浮液20uL后，置于以灭菌蒸馏水为培养介质的培养皿中，封口后在温度为20～25℃、光照强度为2000～3000lx、光照时间为15～16h/d的条件下培养48~72h；（4）将步骤（3）培养后的嫩叶浸泡在三氯乙酸质量含量为0.10~0.15%的乙醇脱色液中，于37℃下恒温脱色36～48h，期间更换2～3次新的上述乙醇脱色液，直至嫩叶完全透明，再用考马斯亮蓝染色液进行染色6~10min，然后用蒸馏水漂洗，最后滴加甘油∶水=1∶1体积比的溶液进行制片；（5）将步骤（4）的制片置于光学显微镜下，观察并以病情指数统计嫩叶上的白粉菌感染情况，即得到该月季嫩叶对白粉病的抗性。