[发明专利]一种快速鉴定月季对白粉病抗性的方法

权利要求书

1.一种快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，其特征在于经过下列各步骤：

（1）以新鲜、健康、完整的月季嫩叶作为侵染材料，用纸袋将嫩叶套袋隔离两周；

（2）将新采集的月季白粉病菌孢子放入灭菌蒸馏水中，调配成孢子含量数为1×10⁴~1×10⁵/ml的分生孢子悬浮液；

（3）取步骤（1）的月季嫩叶洗净并吸干表面水份，在每片嫩叶反面以滴液的方式，接种步骤（2）的分生孢子悬浮液20uL后，置于以灭菌蒸馏水为培养介质的培养皿中，封口后在温度为20～25℃、光照强度为2000～3000lx、光照时间为15～16h/d的条件下培养48~72h；

（4）将步骤（3）培养后的嫩叶浸泡在三氯乙酸质量含量为0.10~0.15%的乙醇脱色液中，于37℃下恒温脱色36～48h，期间更换2～3次新的上述乙醇脱色液，直至嫩叶完全透明，再用考马斯亮蓝染色液进行染色6~10min，然后用蒸馏水漂洗，最后滴加甘油∶水=1∶1体积比的溶液进行制片；

（5）将步骤（4）的制片置于光学显微镜下，观察并以病情指数统计嫩叶上的白粉菌感染情况，即得到该月季嫩叶对白粉病的抗性。

2.根据权利要求1所述的快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步骤（1）的套袋隔离法，将嫩叶提前两周用纸袋套袋。

3.根据权利要求1所述的快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步骤（4）的考马斯亮蓝染色液是质量浓度为0.10~0.15%的三氯乙酸水溶液∶质量浓度为0.50~0.70%的考马斯亮蓝R-250甲醇溶液的体积比=1∶1。

4.根据权利要求1所述的快速鉴定月季对白粉病抗性的方法，其特征在于：所述步骤（5）的病情指数是：

0级为免疫，即无菌丝、无菌落；

1级为高抗，即菌丝长小于100um，无菌落；

2级为中抗，即菌落直径小于400um；

3级为中感，即菌落直径小于800um；

4级为易感，即菌落直径大于1mm。