[发明专利]一种同时定量检测多个受体的抗体芯片试剂盒

摘要

本发明公开了一种同时定量检测多个受体的抗体芯片试剂盒。该试剂盒包括：抗体芯片，选用标准组织玻片作为表面载体，该标准组织玻片采用活性氨基团包被，使多种抗原特异性抗体通过非接触性点样仪牢固地吸附在玻片表面，形成16个微阵列；并用相配套可拆装的2x8孔塑料框架及乳胶封闭框将16个微阵列分隔在互不干扰的小区内。每个捕获抗体在每个抗体微阵列中有四次的重复点样；受体标准品混合物；生物素标记的检测抗体混合物；Cy3荧光染料标记的链霉亲和素。本发明的抗体芯片试剂盒能够同时定量检测多项受体，受体的动态检测范围更广，从单一的样品实验中可以得到四倍于ELISA的重复数据，具有高灵敏度、高通量、样品需用量少、廉价、易推广等优点。

主权项

1.一种同时定量检测多个受体的抗体芯片试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：抗体芯片，包括用活性氨基包被处理的标准组织玻片和在玻片表面上固定的40种受体的特异性抗体、两种阳性对照；四个所述的抗体芯片放于与常规96孔酶标板尺寸相符的芯片固定框上进行标准ELISA系统的自动化操作；所述的标准组织玻片是用非接触性点样仪将多种抗原特异性抗体点成2×8个相同的抗体微阵列，并用相配套可拆装的2×8孔框架把微阵列分割在16个互不干扰的小区内；玻片和框架之间通过两侧的边框夹紧扣形成抗体芯片；所述的抗体芯片是用浓度分别为200ug/ml的40种抗体点样；每种抗体是用含有0.01‑10g/100ml牛白蛋白的特异性PBS缓冲液配制；每个抗体在每个微阵列中有四次的重复点样，以致从单一微阵列中得到该受体四倍于ELISA的实验数据；受体标准品混合物，是将40种受体标准品按照一定的量混合在一起的冻干混合物；生物素标记的受体检测抗体混合物；和荧光染料Cy3标记的链霉亲和素；其中，所述特异性抗体为选自针对如下受体的抗体：肿瘤坏死因子受体4‑1BB、白细胞活化黏附因子、刺激分子B7‑1、B细胞成熟因子、髓系细胞特异性富含亮氨酸糖蛋白、肿瘤坏死因子受体CD30；肿瘤坏死因子配体‑5、癌胚抗原相关细胞黏附分子1、死亡受体6、酪氨酸激酶、细胞膜糖蛋白、受体型酪氨酸激酶ErbB3、E‑选择素、肿瘤坏死因子受体超家族成员6、人FMS样酪氨酸激酶3配体、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关蛋白、疱疹病毒侵入介体、细胞间黏附分子3、白介素‑1受体4、白介素‑1受体1、白介素‑2受体γ、白介素‑10受体β、白介素‑17受体、白介素‑21受体、溶酶体膜蛋白2、载脂蛋白‑2、L‑选择素、淋巴管内皮透明质酸受体1、主要组织相容性复合物I类链相关蛋白A、主要组织相容性复合物I类链相关蛋白B、纽兰格林蛋白1受体1、血小板衍生生长因子受体、血小板内皮细胞粘附分子1、人类晚期糖化终产物受体、细胞免疫球蛋白粘蛋白1、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体、Trappin‑2蛋白、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体、血管细胞粘附分子、X性连锁外胚层发育不良‑A2受体。