[发明专利]一种激光扫描位相显微成像方法及系统

摘要

本发明涉及一种激光扫描位相显微成像方法及系统，它包括由激光器、二向色镜、物镜、扫描平台、会聚透镜、针孔和光电探测器组成的激光共聚焦荧光扫描显微系统和由激光透光部件和荧光挡光部件组成的相位探测系统；激光器出射的激光经激光透光部件发射到二向色镜分光；出射的激光经物镜聚焦到扫描平台上的样品上，聚焦在样品的激光透过样品发射到样品下面的荧光介质上，激光光斑区域与能够激发可探测荧光区域部分重叠，重叠区域被激光激发发射荧光；荧光透射样品经物镜发射到二向色镜分光，出射的荧光经会聚透镜、针孔发射到光电探测部件探测得到样品某一测量点相位，扫描平台带动样品和荧光介质移动，将探测的样品的所有测量点的相位处理得到样品的浮雕状结构图像。本发明可以广泛应用于生物样品的荧光成像过程中。

主权项

一种激光扫描位相显微成像方法，其包括以下步骤：1）设置一包括有激光共聚焦荧光扫描显微系统的激光扫描位相显微成像系统，激光共聚焦荧光扫描显微系统包括有激光器、二向色镜、物镜、扫描平台、会聚透镜、针孔和光电探测器；2）将一生物样品放置在扫描平台上；3）根据实际需要，调节各光学元件之间的距离，使成像系统满足光学显微系统的物象共轭关系；4）在生物样品上方添加荧光介质，并对荧光介质上的荧光物质的浓度进行调制，荧光介质的不同位置代表不同的荧光物质浓度；在对生物样品扫描过程中需要满足照射到荧光介质上的激光光斑能够照亮荧光物质浓度发生变化的区域；5）激光器发出确定光斑尺寸的激光，并发射到二向色镜进行分光，经二向色镜出射的激光发射到物镜，经物镜出射的激光聚焦到生物样品上；6）聚焦到生物样品的激光透过生物样品后照射到荧光介质上，且荧光介质被激光激发发射荧光；7）激发的荧光透过生物样品沿着原光路返回，荧光经物镜发射到二向色镜进行分光，经二向色镜出射的荧光发射到会聚透镜并经针孔由光电探测器接收探测得到生物样品某一测量点的位相；8）扫描平台移动带动生物样品和荧光介质移动，重复步骤5）～7）直到得到生物样品的所有测量点的位相；9）将光电探测器探测得到的生物样品的所有测量点的位相进行处理得到生物样品的浮雕状结构图像。