[发明专利]外周血单核细胞基因组DNA的提取方法在审
申请号: | 201310537799.3 | 申请日: | 2013-11-05 |
公开(公告)号: | CN103614364A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 辛竹 | 申请(专利权)人: | 辛竹 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了外周血单核细胞基因组DNA的提取方法,其特征在于,步骤如下:首先,取目的淋巴细胞,其中注入所需缓冲液GA,震荡至彻底悬浮;加入PA,100毫升,高速离心振荡至少半分钟,然后在35摄氏度的环境下静置3-5分钟;加入蛋白酶,颠倒混匀,放置10分钟后,再次颠倒混匀,反复三到四次;加入缓冲液,吹打混匀;加入纯无水乙醇;注入离心管中,高速离心,去除沉淀物;将沉淀物吸附出来;沉淀物种加入漂洗也,然后弃上清;采用分光光度计即可进行测定RNA纯度;在进行鉴定浓度之前,需要在先在零下十度的环境下放置三到五分钟;所述测定浓度之前,可以向其中央滴入三到四滴洗脱缓冲液。本发明的有益效果是:操作简单,成本较低,为肿瘤免疫治疗提供新的思路、方法和途径,同时可以促进免疫杀伤作用。 | ||
搜索关键词: | 外周血 单核 细胞 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
外周血单核细胞基因组DNA的提取方法,其特征在于,步骤如下:首先,取目的淋巴细胞,其中注入所需缓冲液GA,震荡至彻底悬浮;加入PA,100毫升,高速离心振荡至少半分钟,然后在35摄氏度的环境下静置3‑5分钟;加入蛋白酶,颠倒混匀,放置10分钟后,再次颠倒混匀,反复三到四次;加入缓冲液,吹打混匀;加入纯无水乙醇;注入离心管中,高速离心,去除沉淀物;将沉淀物吸附出来;沉淀物种加入漂洗也,然后弃上清;采用分光光度计即可进行测定RNA纯度。
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