[发明专利]对转染后的siRNA进行初步筛选的简易方法无效
| 申请号： | 201310531432.0 | 申请日： | 2013-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN103614463A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 刘军 | 申请（专利权）人： | 刘军 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 116000 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了对转染后的siRNA进行初步筛选的简易方法。首先在细胞培养皿中接种所需数目六倍的PK细胞，所述PK细胞为处于生长期的PK15细胞；然后将上述细胞浸入融合剂中，进行完全培养，保持温度始终保持在35摄氏度；24小时后进行转染；转染前，将转染剂加入至培养皿中，混合振荡，弃清；随后按比例，将siRNA与血清加入至培养皿中，混合均匀5分钟；转染10小时；高速离心；加入预凉的异丙醇，上下翻转混匀即可；引物工作液需要在离心前加入，并且事先需要在零下八十度的条件下保存；高速离心后需要用枪头敲打，洗涤沉淀物。本发明的有益效果是，可以有效鉴定PVCR，同时效果明显，表达清楚、稳定，为下一步能够成功建立模型奠定坚实基础。 | ||
| 搜索关键词： | 转染 sirna 进行 初步 筛选 简易 方法 | ||
【主权项】：
对转染后的siRNA进行初步筛选的简易方法，其特征在于，首先在细胞培养皿中接种所需数目六倍的PK细胞，所述PK细胞为处于生长期的PK15细胞；然后将上述细胞浸入融合剂中，进行完全培养，保持温度始终保持在35摄氏度；24小时后进行转染；转染前，将转染剂加入至培养皿中，混合振荡，弃清；随后按比例，将siRNA与血清加入至培养皿中，混合均匀5分钟；转染10小时；高速离心；加入预凉的异丙醇，上下翻转混匀即可。
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