[发明专利]一种用于检测KRAS基因热点突变的试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201310466108.5 | 申请日： | 2013-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN103571947A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 叶伦;李雪梅;付金玲;陈刚 | 申请（专利权）人： | 武汉康录生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 | 代理人： | 邬丽明 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，公开了一种用于检测KRAS基因热点突变的试剂盒及其检测方法。本发明试剂盒包含PNA试剂，利用钳夹技术封闭野生型KRAS基因序列，从而提高sanger测序法的灵敏度和KRAS基因突变的检出率。本发明检测方法操作简单、安全，不需要较多昂贵试剂的使用，经济高效；同时还具有操作时间短的优点，整个检测过程可在4～6小时内完成。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 kras 基因 热点 突变 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种用于检测KRAS基因热点突变的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液、PNA试剂、酶消化液、测序反应液、磁珠和产物纯化液，所述PCR反应液包含PCR缓冲液、dNTPs、PCR正向引物、PCR反向引物、探针和DNA聚合酶，所述PCR正向引物的序列为SEQ.ID NO.1，所述PCR反向引物的序列为SEQ.ID NO.2，所述探针的序列为SEQ.ID NO.3，所述探针的5’端的荧光基团为FAM，3’端的荧光基团为BHQ1；所述PNA的序列为SEQ.ID NO.4；所述测序反应液包含Bigdye、Bigdye缓冲液和测序引物。
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