[发明专利]高蛋白沙漠绿藻的工业化培养方法

摘要

本发明涉及微生物藻类的培养方法，是一种高蛋白沙漠绿藻的工业化培养方法，该方法按下述步骤进行：第一步，分离出沙漠绿藻培养物；第二步，将单个沙漠绿藻落接种在固体平板上重复培养直至接种8代至10代，得藻体；第三步，将藻体接种到液体培养基中，工业化密闭培养3天至15天。本发明先对沙漠绿藻进行培养，提高沙漠土壤培养液中细胞浓度，获得目的藻种生物量高的目的藻种沙漠土壤培养液后再进行分离目的藻种，然后进行纯化获得高产的目的藻种后，最后进行大规模的工业化培养，这样能保证成功分离目的藻株，并且本发明采用的培养方法为全无菌培养，不会受到污染源及有害菌的污染，在保证沙漠绿藻产量的情况下，能够大规模培养沙漠绿藻。

主权项

一种高蛋白沙漠绿藻的工业化培养方法，其特征在于按下述步骤进行：第一步，分离，称取沙漠土壤样品，按每50g至100g沙漠土壤样品中加入200ml至400ml的TAP液体培养基计，向沙漠土壤样品中加入TAP液体培养基，在转速为100rpm至120rpm条件下用摇床摇5 min 至15min，使样品与培养基充分混合，将混合物在温度为25℃至31℃、光照为2000Lux至3000Lux条件下培养3天至15天，等培养物上清液变绿后，按每200μL至300μL上清液涂布在25ml至30ml TAP固体培养基上计，在无菌条件下吸取上清液，涂布在含有TAP固体培养基的培养皿中，并在温度为25℃至31℃、光照为2000Lux至3000Lux条件下培养3天至15天得到沙漠绿藻培养物；第二步，纯化，按每单个沙漠绿藻落接种在25ml至30mlTAP固体培养基上计，用已灭过菌的接种环在沙漠绿藻培养物中挑取单个沙漠绿藻落，划线法接种在含有TAP固体培养基的固体平板上，在温度为25℃至31℃、光照为2000Lux至3000Lux条件下培养3天至15天得到一代沙漠绿藻藻体，再用已灭过菌的接种环在一代沙漠绿藻藻体中挑取单个沙漠绿藻落接种在含有新的TAP固体培养基的固体平板上，在温度为25℃至31℃、光照为2000Lux至3000Lux条件下培养3天至15天得到二代沙漠绿藻藻体，重复直至接种8代至10代，最后得到纯沙漠绿藻藻体；第三步，工业化培养，按每个单藻落接种到100ml至500ml TAP液体培养基上计，在纯沙漠绿藻藻体中挑取单藻落，接种到TAP液体培养基中，在温度为25℃至31℃、光照为2000 Lux至4000 Lux条件下进行密闭培养3天至15天制备得到生物量达到1011个细胞/ml至1012个细胞/ml的沙漠绿藻母种子悬浮液，按每50L至500L TAP液体培养基中接入1%至3%体积的沙漠绿藻母种子悬浮液计，向新的TAP液体培养基中接入沙漠绿藻母种子悬浮液，在温度为25℃至31℃、光照为2000Lux至4000Lux条件下进行工业化密闭培养3天至15天。