[发明专利]一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法无效
| 申请号： | 201310447516.6 | 申请日： | 2013-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN103525896A | 公开（公告）日： | 2014-01-22 |
| 发明（设计）人： | 陈怡露;徐俊;韦萍;陈亚利;雍晓雨;郑涛;柏建新;许琳;费文斌 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/06 | 分类号： | C12Q1/06 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 211816 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 ttc 染色 活力 酵母 细胞 定量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，其特征在于包括以下步骤：1）将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；2）将步骤1）中培养的单菌落接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1‑3之间，离心弃上清；然后在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10‑15S后离心；3）将步骤2）中震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及步骤2）中测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。
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