[发明专利]一种随机突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体基因及其编码蛋白质和应用有效
申请号: | 201310438191.5 | 申请日: | 2013-09-24 |
公开(公告)号: | CN103484489A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
发明(设计)人: | 史锋;谢一龙;李永富;李烨 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N15/60 | 分类号: | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12P13/00;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 何自刚;王玉松 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了两种pH作用范围拓宽的谷氨酸脱羧酶突变体,其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3,氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4。本发明结合随机突变(易错PCR)技术和DNA定点突变技术,对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造,得到了两种突变酶GadB1T17I/D294G/Q346H和GadB1T17I/D294G/E312S/Q346H,相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展,尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽,突变酶在pH5.5~6.5条件下,仍然具有较高的催化活性,因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时,在pH5.5~6.5时,催化能力低的问题,为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。 | ||
搜索关键词: | 一种 随机 突变 获得 谷氨酸 脱羧酶 突变体 基因 及其 编码 蛋白质 应用 | ||
【主权项】:
一种谷氨酸脱羧酶突变体基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.1。
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