[发明专利]一种黄芪试管苗培养的快速繁殖方法

摘要

本发明研究了一种黄芪试管苗培养的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导，壮苗培养，寡糖素调控试管苗酶的活性及黄芪皂苷的含量等步骤，本发明方法所制备的黄芪试管苗含有较高含量的黄芪皂苷。本发明方法利用寡糖素对黄芪试管苗进行有目的的调控，可以在短期内获得大量次生代谢物含量高的黄芪试管苗，进行大规模的工业化生产，并能有效降低生产成本。

主权项

一种黄芪试管苗培养的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导，壮苗培养，寡糖素调控试管苗酶的活性及黄芪皂苷的含量，其主要步骤如下：（1）按照植物组织培养常规消毒方法对野外采取的黄芪带芽茎段进行消毒处理，获得无菌的外植体；（2）将步骤（1）获得的无菌黄芪带芽茎段接种到芽诱导培养基中进行腋芽诱导，诱导出来萌发的腋芽接种入增值培养基中进行腋芽增值，增值培养3‑4代，获得长势良好带有叶片的丛生芽；（3）将步骤（2）获得的丛生芽接种到附加激素0.2‑1 mg/L NAA和0.5‑1.5 mg/L TDZ的DKW培养基中进行生根诱导培养，获得完整的黄芪试管苗，将其接入MS培养基中进行壮苗培养；（4）将步骤（3）获得的生长强壮的黄芪试管苗接种入DKW+0.5mg/LNAA+1mg/LTDZ+寡糖素2‑6mg/L，培养一段时间取黄芪试管苗叶片，然后60℃烘干保存干样，微波提取黄芪皂苷，使用UV法检测黄芪皂苷的含量。