[发明专利]一种依替巴肽的液相合成方法

摘要

本发明涉及一种液相合成多肽药物依替巴肽的方法，属于多肽的合成技术领域。所述技术方案如下：（1）合成肽段Mpa(R1)-Lys(R2)-Gly-OH；（2）合成肽段H-Asp(R3)-Trp-Pro-Cys(R4)-NH2；（3）将肽段Mpa(R1)-Lys(R2)-Gly-OH和肽段H-Asp(R3)-Trp-Pro-Cys(R4)-NH2缩合得到线性肽Mpa(R1)-Lys(R2)-Gly--Asp(R3)-Trp-Pro-Cys(R4)-NH2；（4）将线性肽Mpa(R1)-Lys(R2)-Gly--Asp(R3)-Trp-Pro-Cys(R4)-NH2环化形成分子内二硫键，得到侧链保护的环肽；（5）脱除环肽的侧链保护基；（6）将环肽Lys的侧链氨基转化为胍基，得到依替巴肽。本发明液相合成依替巴肽的方法，避免使用Fmoc-Har-OH这一特殊氨基酸衍生物为起始原料，建立了将环肽氨基转化为胍基的条件及方法，原料试剂均价廉易得，能有效降低产品成本，显著提高生产效益。

主权项

1.一种依替巴肽的液相合成方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将H-Cys(Trt)-NH₂与Fmoc-Pro-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到二肽Fmoc-Pro-Cys(Trt)-NH₂；然后脱除所述Fmoc-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保护基，得到H-Pro-Cys(Trt)-NH₂；再将得到的所述H-Pro-Cys(Trt)-NH₂与Fmoc-Trp-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到三肽Fmoc-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；2）将步骤1）中得到的Fmoc-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保护基脱除，得到H-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；然后将所述H-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂与Fmoc-Asp(OtBu)-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到四肽Fmoc-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；再将所述Fmoc-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂中的Fmoc保护基脱除，得到四肽H-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂，备用；3）将H-Gly-OMe与Cbz-Lys(Boc)-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到二肽Cbz-Lys(Boc)-Gly-OMe；然后将所述Cbz-Lys(Boc)-Gly-OMe中的Cbz保护基脱除，得到H-Lys(Boc)-Gly-OMe；再将所述H-Lys(Boc)-Gly-OMe与Mpa(Trt)-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OMe；再将所述三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OMe用NaOH溶液水解，然后再依次用水和乙醚浸洗，得到三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OH，其中所述水和乙醚质量比为3:1；4）将步骤2）中得到的四肽H-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂与步骤3）中得到的三肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-OH进行偶合反应，然后再依次进行洗涤、干燥、减压蒸馏、加乙醚重结晶后得到线性七肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂；5）将步骤4）得到的线性七肽Mpa(Trt)-Lys(Boc)-Gly-Asp(OtBu)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH₂环化得到环肽6）将步骤5）得到的溶于饱和的HCl和AcOEt溶液，脱除所述侧链β-羧基上的-OtBu和ε-氨基上的-Boc的保护基，得到环七肽盐酸盐7）将环七肽盐酸盐中Lys的侧链氨基在三氧化硫脲作用下转化为胍基，得到所述依替巴肽。