[发明专利]从香菇C91-3菌株中提取抗氧化、抗肿瘤Latcripin-3基因片段的方法有效
| 申请号： | 201310337850.6 | 申请日： | 2013-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN103421766A | 公开（公告）日： | 2013-12-04 |
| 发明（设计）人： | 黄敏;安晓华;钟民涛;伦永志;张伟;王晓丽;刘奔;李星云;曹婧;宁安红 | 申请（专利权）人： | 大连医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人： | 闪红霞 |
| 地址： | 116044 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开一种从香菇C91-3菌株中提取抗氧化、抗肿瘤Latcripin-3基因片段的方法，依次按如下步骤进行：提取香菇C91-3菌株的菌丝体总RNA；将菌丝体总RNA反转录合成CDNA；以所得到的cDNA为模板，以插入BamHⅠ和XhoⅠ两个限制性内切酶位点的PCR反应引物进行PCR反应，上游引物BamHⅠ：(5′-3′)GGCTGATATCGGATCCCTTGCCCAAGATCTTACCG下游引物XhoⅠ：(5′-3′)GGTGGTGGTGCTCGAGGTCGGGGCAGTGAGGAATT；将所得到的PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，纯化750 bpMarker附近的明显条带，切胶回收DNA片段。 | ||
| 搜索关键词： | 香菇 c91 菌株 提取 氧化 肿瘤 latcripin 基因 片段 方法 | ||
【主权项】：
一种从香菇C91‑3菌株中提取抗氧化、抗肿瘤Latcripin‑3基因片段的方法，其特征在于依次按如下步骤进行：a. 提取香菇C91‑3菌株的菌丝体总RNA；b. 将菌丝体总RNA反转录合成cDNA；c. PCR扩增目标基因：以所得到的cDNA为模板、以插入BamHⅠ和XhoⅠ两个限制性内切酶位点的PCR反应引物进行PCR反应；所述PCR反应引物序列如下：上游引物BamHⅠ：( 5′‑3′)GGCTGATATCGGATCCCTTGCCCAAGATCTTACCG下游引物XhoⅠ：( 5′‑3′)GGTGGTGGTGCTCGAGGTCGGGGCAGTGAGGAATT；d. 回收纯化DNA片段：将所得到的PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，纯化750 bpMarker附近的明显条带，切胶回收DNA片段。
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