[发明专利]转基因番茄的组织培养方法

摘要

本发明提供一种转基因番茄的组织培养方法。番茄（Lycopersicon esculentum）是世界各地广泛种植的一年生或多年生的蔬菜。本发明利用不同的光照强度组织培养一种富含虾青素的转基因番茄，实验结果表明在光照强度为5000lux的培养条件下，转基因番茄愈伤组织分化的芽数量达到12个，玻璃化比例为20%，愈伤组织褐化率和死亡率分别为1.3%和5%。此方法可确定5000lux光照强度是较适于转基因番茄组织培养的培养条件，为进一步研究富含虾青素的转基因番茄人工高效繁育技术体系的建立奠定了技术基础。

主权项

转基因番茄的组织培养方法，将转基因番茄种子萌发幼苗栽培在普通温室中50天，取其幼嫩叶片消毒放入MS基本培养基+ZT（2mg/L）+IAA(0.05mg/L)，30g/L的蔗糖，8.5g/L琼脂的愈伤组织诱导培养基中，调节PH值至5.8诱导愈伤组织，其培养条件为温度25℃，光照强度为3000lux，光照时间为12h，相对湿度为60%，培养20天后，诱导出绿色半透明愈伤组织，将此愈伤组织继代入盛有MS基本培养基+ZT（1mg/L）+IAA(0.03mg/L)，再加入30g/L的蔗糖，8.5g/L琼脂的分化培养基的玻璃瓶中，调节PH值至5.8，将接入愈伤组织的玻璃瓶放入光照强度为2500lux,5000lux,10000lux,20000lux四种光照强度下培养，温度为25℃±1℃，湿度60%±5%，二氧化碳浓度400ppm±50ppm，光照时间为12小时/天的培养室中，每30天继代1次，培养90天。